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上海酶聯(lián)生物研究所

我司講述:ELISA試劑盒血清標(biāo)本保存技巧

時(shí)間:2020-4-21閱讀:379
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ELISA試劑盒血清標(biāo)本保存的技巧:


1.標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心沉積后取上清檢測(cè)。


2.血清標(biāo)本如是以無菌操作別離,則能夠在2~8℃下保存一周,ELISA如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長(zhǎng)期保存,應(yīng)在-70℃以下。

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3.樣本的收集及血清別離中要注意盡量防止細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的生長(zhǎng),其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作符號(hào)的測(cè)定辦法發(fā)生非特異性干擾。


4.冰凍保存的血清標(biāo)本須注意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生破壞效果,從而引起假陰性結(jié)果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)注意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,重復(fù)倒置混勻即可。


5.ELISA試劑盒要注意防止出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過氧化物的活性,因此,在以HRP為符號(hào)酶的測(cè)定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡(jiǎn)單在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反響顯色。

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