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一、實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備
1.常見問題
① 加樣器不準(zhǔn)確;尤其10ul以下的加樣器,對(duì)結(jié)果影響*;
② 保溫設(shè)備不良;
③ 洗滌用水不規(guī)范。
2.解決方案
① 校正加樣器;10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國等);
② 仔細(xì)校正溫度到37℃,水浴箱為佳;
③ 必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來水、礦泉水等。
④ 認(rèn)真閱讀使用說明書。
二、樣品加樣
1.常見問題
① 加樣不準(zhǔn)確;
② 沒有混勻。
2.解決方案
① 加樣時(shí)一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯(cuò)加。
② 加樣后,反復(fù)抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導(dǎo)致非特異性吸附。
三、洗滌不*這么辦?
1. 每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘;
2. 選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分;
3. 可選用塑料洗滌瓶。
四、結(jié)果判斷
1.常見問題
① 包括陰性對(duì)照孔在內(nèi),各孔顯色普遍偏深;
② 包括陽性對(duì)照在內(nèi),各孔均無顯色;
③ 陽性對(duì)照不顯色,而其它樣本顯色正常;
④ 有些標(biāo)本顯色不深,判斷陽性困難。
2.解決方案
① 可能是洗滌不充分;加樣過量;溫育時(shí)間過長溫度過高;按說明書重新操作。如無改善,可與生產(chǎn)廠家;
② 可能是漏加樣本或酶液;溫育時(shí)間過短溫度過低;試劑保存不當(dāng)活性下降;按說明書重新操作。如無改善,可與生產(chǎn)廠家;
③ 陽性對(duì)照漏加、錯(cuò)加或失效。重新操作。如無改善,可與廠家,索要對(duì)照品;
④ 重新操作。使用酶標(biāo)儀,測定光吸收度,按P/N值標(biāo)準(zhǔn)判斷。
五、試劑不規(guī)范
一定要在2-8℃存放。不得過高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。
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