ELISA試劑盒時許多重要的環(huán)節(jié)都會影響到ELISA試劑盒檢測的質(zhì)量。
下面與大家分享幾種方法：
一、方法學的影響
ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法因受操作時差所引起的競爭等因素的影響，結(jié)果重復性較差，質(zhì)量較難控制。
二、試劑因素
（1）ELISA試劑盒的選擇
免疫檢測的原理均基于抗原抗體反應。由于該反應過程受多種因素的影響，如普遍存在基質(zhì)效應、交叉反應等，因而檢測結(jié)果難以溯源，不同方法、不同試劑之間甚至同一試劑不同批號間結(jié)果均缺乏可比性。試劑質(zhì)量在很大程度上決定了檢測的水平，因此在引入新項目之前必須對試劑進行嚴格的評估。試劑的評估有以下幾個步驟：⑴確定開展該項目的必要性；⑵了解該項目現(xiàn)有的檢測方法和原理；⑶在了解試劑的組成基礎上選擇多家試劑盒進行比較，判斷標準參考方法或參考物質(zhì)，其次為臨床的滿意度及機構(gòu)的報告如各級室間質(zhì)量評價、CDC報告等；⑷定期對檢測結(jié)果進行追蹤反饋直至zui終認可該試劑。
（2）ELISA試劑盒的準備
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復雜過程，并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性；對于效期短、使用率低的試劑，應當小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反復凍融造成試劑的失效。
試劑使用前必須平衡至室溫，否則會影響檢測下限。未用完的室內(nèi)質(zhì)控品及本次不需使用的試劑應密封并及時放回冰箱保存。