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上海酶聯(lián)生物研究所

ELISA試劑盒樣品濃度處理方法

時(shí)間:2017-1-26閱讀:176
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ELISA試劑盒現(xiàn)在,已泛起多種檢查尿中微量白蛋白的辦法,如化學(xué)發(fā)光法、放射免疫法、試條半定量法、免疫比濁法等。
滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的攪擾物質(zhì)洗刷下來(lái)。洗刷板:能夠說(shuō)在ELISA試劑盒操作中,洗刷是zui主要的樞紐技能。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)呈S型的規(guī)范曲線(xiàn),盡量要使試驗(yàn)樣品的濃度在中心坡度zui陡段,即曲線(xiàn)簡(jiǎn)直成直線(xiàn)的規(guī)模內(nèi)。
ELISA試劑盒使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀況,從而脫離固相載體。
洗刷液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時(shí),可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。
再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。
選用倍比稀釋法制造規(guī)范曲線(xiàn)中的規(guī)范樣品濃度,這么就能夠確保規(guī)范樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的違背。
檢查規(guī)范樣品時(shí),應(yīng)按濃度遞加次序進(jìn)行,以削減高濃度對(duì)低濃度的影響,進(jìn)步準(zhǔn)確性。
S曲線(xiàn)的低濃度有些能夠用乘冪方程*的擬合,中低濃度有些能夠用直線(xiàn)方程,中心有些可用對(duì)數(shù)方程,而中后段可用四參數(shù)。
ELISA試劑盒樣品的濃度等目標(biāo)是依據(jù)規(guī)范曲線(xiàn)計(jì)算出來(lái)的,所以首要要把做規(guī)范曲線(xiàn)看作是比做正式試驗(yàn)還要主要的一件事,不然后邊的試驗(yàn)結(jié)果無(wú)從談起。
ELISA試劑盒如果用于定量,仍是在中心一段較 好。這些辦法盡管沒(méi)有一種辦法能夠通用,但也都能夠用。關(guān)鍵在于你的規(guī)范曲線(xiàn)做到了S形的哪一有些,你想檢查的樣品濃度在曲線(xiàn)的哪一有些。
設(shè)置規(guī)范曲線(xiàn)樣品的規(guī)范濃度規(guī)模要有一個(gè)比較大的跨度,而且要能涵蓋你所要的濃度,即樣品的濃度要在規(guī)范曲線(xiàn)濃度規(guī)模之內(nèi),包括上限和下限。
 

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