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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>公司動(dòng)態(tài)>>免疫組化的常用方法
現(xiàn)在幾種常用免疫組化辦法簡(jiǎn)略介紹
1)免疫熒光辦法
是zui早樹立的免疫安排化學(xué)技能。它運(yùn)用抗原抗體特異性的原理,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針查看細(xì)胞或安排內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下調(diào)查。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)宣布必定波長(zhǎng)的熒光,然后可確定安排中某種抗原的定位,進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。因?yàn)槊庖邿晒饧寄芴禺愋詮?qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)潔,所以在臨床病理確診、查驗(yàn)中運(yùn)用較廣。
2)免疫酶標(biāo)辦法
免疫酶標(biāo)辦法是繼免疫熒光后,于 60 年代發(fā)展起來(lái)的技能?;驹硎窍纫悦阜?hào)的抗體與安排或細(xì)胞效果,然后參加酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有必定電子密度的顆粒,經(jīng)過(guò)光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研討。免疫酶標(biāo)技能是現(xiàn)在zui常用的技能。 本辦法與免疫熒光技能比較的首要長(zhǎng)處是:定位,對(duì)比度好,染色標(biāo)本可長(zhǎng)時(shí)間保留,合適于光、電鏡研討等。 免疫酶標(biāo)辦法的發(fā)展非常敏捷,現(xiàn)已衍生出了多種符號(hào)辦法,且跟著辦法的不斷改進(jìn)和立異,其特異性和靈敏度都在不斷提高,運(yùn)用也越來(lái)越便利。現(xiàn)在在病理確診中廣為運(yùn)用的有 ABC 法、SP 三步法、即用型二步法檢測(cè)體系等。
3)免疫膠體金技能
免疫膠體金技能是以膠體金這么一種特殊的金屬顆粒作為符號(hào)物。膠體金是指金的水溶膠,它能敏捷而穩(wěn)定地吸附蛋白,對(duì)蛋白的生物學(xué)活性則沒有顯著的影響。因而,用膠體金符號(hào)一抗、二抗或別的能特異性免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌 A 蛋白)等作為探針,就能對(duì)安排或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位,乃至定量研討。因?yàn)槟z體金有不一樣巨細(xì)的顆粒,且膠體金的電子密度高,所以免疫膠體金技能格外合適于免疫電鏡的單符號(hào)或多符號(hào)定位研討。因?yàn)槟z體金自身呈淡至深赤色,因而也合適進(jìn)行光鏡調(diào)查。如運(yùn)用銀加強(qiáng)的免疫金銀規(guī)律更便于光鏡調(diào)查。
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