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雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:
1)將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體,洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
2)加受檢標本,保溫反應,標本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復合物,洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3)加酶標抗體,保溫反應,固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合,*洗滌未結(jié)合的酶標抗體,此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
4)加底物顯色,固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物,通過比色,測知標本中抗原的量。
ELISA試劑盒間接法是檢測抗體常用的方法,操作步驟如下:
(1)將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原,洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
(2)加稀釋的受檢血清,保溫反應,血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復合物,經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體,血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。
(3)加酶標抗抗體。
(4)加底物顯色。
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