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上海酶聯(lián)生物研究所

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小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞(Beta-TC-6)

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所在地上海市

更新時間:2017-07-26 11:42:04瀏覽次數(shù):191次

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小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞(Beta-TC-6)在科研中深受科研工作者的喜歡,而市面上各種試劑產(chǎn)品,不計其數(shù),采購優(yōu)良試劑請跟我來,這里全心專注科研,助您創(chuàng)新科技,盡享成功,我們希望為您奉上滿意的產(chǎn)品,期待您的來電來咨詢!

小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞(Beta-TC-6)
細(xì)胞介紹
這株細(xì)胞來源于轉(zhuǎn)基因小鼠中生長的一個胰腺腫瘤(胰島素瘤)。這種小鼠攜帶了大鼠胰島素II基因啟動子調(diào)控的SV40早期基因的假基因結(jié)構(gòu)。細(xì)胞包含豐富的胰島素和小量的胰高血糖素及*。響應(yīng)葡萄糖而分泌胰島素[PubMed:7533732]
細(xì)胞特性
1)來源:胰島素瘤
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝細(xì)胞接受后的處理:
1.收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2.請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養(yǎng)約2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4.如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5.接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉谩?br />

小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞(Beta-TC-6)
細(xì)胞用途:僅供科研使用。本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考

1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備 DMEM/F12 培養(yǎng)基(DMEM/F12,GIBCO,貨號 10565-042),90%;胎牛血清,10%。
2. 培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37°C,培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。
第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

 

小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞(Beta-TC-6)
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培養(yǎng)液后吹勻。移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,先要消化處理并進行細(xì)胞計數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進行,zui后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。

注意事項:
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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