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包被用抗原或抗體的濃度,ELISA試劑盒包被的溫度和時(shí)間,包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)的特點(diǎn)和材料的性質(zhì)而選定??贵w和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置過(guò)夜,37℃中保溫2小時(shí)被認(rèn)為具有同等的包被效果。包被的zui適當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化,每批材料需通過(guò)實(shí)驗(yàn)與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。
ELISA試劑盒免疫實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
一、標(biāo)本收集體積 100μl 。當(dāng)天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)標(biāo)本儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?biāo)本2-8℃可以保存48小時(shí);-20℃可以保存1個(gè)月,-70℃可以保存6個(gè)月。標(biāo)本避免反復(fù)凍融。
二、血清標(biāo)本采集避免溶血。紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放具有過(guò)氧化物酶活性物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
三、標(biāo)本宜在新鮮時(shí)代測(cè)。保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的樣本可能發(fā)生聚合,ELISA實(shí)驗(yàn)中會(huì)使本底加深。
四、反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)降低,樣本可以少量分裝保存或者適當(dāng)加入防腐劑。
五、如果您在購(gòu)買我們公司試劑盒后操作中遇到任何特殊問(wèn)題,敬請(qǐng)咨詢我司。
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