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微生物固體培養(yǎng)實驗

閱讀:233發(fā)布時間:2015-06-10

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實驗材料    細(xì)菌
試劑、試劑盒    胰化蛋白胨酵母提取物氯化鈉NaOH
儀器、耗材    培養(yǎng)瓶玻璃棒離心管搖床
實驗步驟    
1.  在3個無菌培養(yǎng)試管中各加人5 ml LB培養(yǎng)液,并標(biāo)上序號1、2、3。

2.  吸取5 μl 細(xì)菌培養(yǎng)液加入1號試管中振蕩揺勻。

3.  接著從1號試管吸5 μl 稀釋液加入 2號試管振蕩搖勻。

4.  從2號試管吸5 μl 稀釋液加入3號試管振蕩搖勻,每次都使用新的吸頭。
 
5.  從每個試管中分別取100 μl 菌液涂布于LB平皿上,并且做好記號,待平板干后于 37℃培養(yǎng)。
 
6.  計算每亳升細(xì)菌細(xì)胞數(shù):細(xì)菌細(xì)咆數(shù)/ml=10×菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)。

7.  包裹好平板保存于4℃以備進一步實驗用。
實驗材料    細(xì)菌
儀器、耗材    接種環(huán)培養(yǎng)皿
實驗步驟    
一、實驗準(zhǔn)備
 
1.  接種環(huán)
 
(1)滅菌,將接種環(huán)置于本生燈火焰中灼燒直至變紅。
 
(2)冷卻,將接種環(huán)觸碰無菌瓊脂平板的表面直至其不發(fā)出咝咝聲。

二、實驗步驟 

1.  采用無菌操作技術(shù),用接種環(huán)將接種物從平板的一側(cè)開始劃線。
 
2.  重新消毒接種環(huán),從*劃線處將樣品劃線至平板的其佘部分,重復(fù)劃線直至覆蓋整個平板。

3.  于37℃培養(yǎng)直至長出單菌落。
 
4.  如果要從很多的菌液中分離單克隆,可以將平 板分為4、6或8小份,在每個小份中劃出單克隆。

實驗材料    細(xì)菌
儀器、耗材    涂布棒培養(yǎng)箱培養(yǎng)皿
實驗步驟    
一、實驗準(zhǔn)備
 
1.  涂布棒
 
(1)加熱并彎曲一支直徑4 mm 的玻璃管或巴斯德吸管制備涂布棒。

(2)滅菌,將涂布棒的三角部分浸沒于酒精中,從容器中取出后再通過燈焰,點燃其上的乙醇。
 
(3)待涂布棒上的火焰熄滅后,將其觸碰無菌瓊脂平板的表面使其冷卻。
 
 
 
二、實驗步驟 

1.  吸取0.05~1 ml 培養(yǎng)物至一只干的平板上。
 
2.  用涂布棒作圓周運動將培養(yǎng)液涂布均勻,或用涂布棒的邊緣在平板的表面劃光柵圖案 (一系列平行線)然后轉(zhuǎn)動平板并與已涂布的平行線成直角重復(fù)涂布。

3.  平板蓋微開至平板*晾干,于37℃培養(yǎng)。


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