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HPLC的故障及處理

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(一) 保留時(shí)間變化

1.柱溫變化 柱恒溫。

2.等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱。

3.緩沖液容量不夠 用>25mmol/L的緩沖液。

4.柱污染 每天沖洗柱。

5.柱內(nèi)條件變化 穩(wěn)定進(jìn)樣條件，調(diào)節(jié)流動(dòng)相。

6.柱快達(dá)到壽命 采用保護(hù)柱。

(二) 保留時(shí)間縮短

1.流速增加 檢查泵，重新設(shè)定流速。

2.樣品超載 降低樣品量。

3.鍵合相流失 流動(dòng)相pH值保持在3～7.5，檢查柱的方向，

4.流動(dòng)相組成變化 防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀。

5.溫度增加 柱恒溫。

(三) 保留時(shí)間延長

1.流速下降 管路泄漏，更換泵密封圈，排除泵內(nèi)氣泡。

2.硅膠柱上活性點(diǎn)變化 用流動(dòng)相改性劑，如加三乙胺，或采用堿至鈍化柱。

3.鍵合相流失 同前(二)3。

4.流動(dòng)相組成變化 同前(二)4。

5.溫度降低 同前(二)5。

(四) 出現(xiàn)肩峰或分叉

1.樣品體積過大 用流動(dòng)相配樣，總的樣品體積小于*峰的15%。

2.樣品溶劑過強(qiáng) 采用較弱的樣品溶劑。

3.柱塌陷或形成短路通道 更換色譜柱，采用較弱腐蝕性條件。

4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效 更換燒結(jié)不銹鋼，加在線過濾器，過濾樣品。

5.進(jìn)樣器損壞 更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子。


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