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上海一研生物科技有限公司

原位雜交組織化學(xué)的取材

時(shí)間:2015-7-20閱讀:389
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     取材
    用于原位雜交反應(yīng)的組織應(yīng)盡可能新鮮,因此要求取材迅速。由于很多RNA極易降解,取下的組織應(yīng)盡可能迅速固定或冷凍。為了避免外源性RNA酶引起靶組織中RNA丟失,取材時(shí)應(yīng)戴手套,所用的器械、容器都要經(jīng)高壓消毒,或清潔后用經(jīng)焦碳酸二乙酯(diethylpyrocarbonate,DEPC)處理過(guò)的滅菌蒸餾水清洗。此外,避免用手直接接觸組織、器械、容器和溶液等。ELISA試劑盒
 
    固定
    進(jìn)行原位雜交時(shí),組織常需要用化學(xué)固定劑進(jìn)行固定。在固定劑的應(yīng)用和選擇上應(yīng)兼顧三個(gè)方面,即保持良好的細(xì)胞結(jié)構(gòu),zui大限度地保持細(xì)胞內(nèi)DNA或RNA的水平和使探升易于進(jìn)人細(xì)胞。DNA比較穩(wěn)定,固定劑的種類和濃度并不十分重要,而RNA極易被降解。故在固定時(shí),固定劑的種類、濃度和固定時(shí)間均十分重要。

    固定劑  固定劑分為沉淀固定劑和交聯(lián)固定劑兩類。常用的沉淀固定劑有乙醇和丙酮等,交聯(lián)固定劑有多聚甲醛和戊二醛等。經(jīng)用沉淀固定劑固定的組織通透性較好,利于探針穿人組織,但沉淀固定劑可能引起RNA的丟失,而且保存組織形態(tài)結(jié)構(gòu)也不十分理想。醛類交聯(lián)固定劑可較好地保存組織中的RNA,對(duì)保存組織形態(tài)結(jié)構(gòu)優(yōu)于沉淀固定劑,但由強(qiáng)交聯(lián)固定劑戊二醛固定后的組織通透性很低,探針較難進(jìn)入其中。一般認(rèn)為,4%多聚甲醛固定對(duì)檢測(cè)mRNA的組織較為理想,它既能有效地保存靶RNA和組織形態(tài)結(jié)構(gòu),又可使組織具有一定通透性。ELISA試劑盒

英文名稱 Mus musculus (Mouse) 蛋白激酶N2(PKN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 蛋白激酶N1(PKN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 蛋白激酶D2(PKD2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Rattus norvegicus (Rat) 蛋白激酶D1(PRKD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Mus musculus (Mouse) 蛋白激酶D1(PRKD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 蛋白激酶D1(PRKD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 蛋白激酶Cι(PKCι)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
ELISA試劑盒英文名稱 Homo sapiens (Human) 蛋白激酶Cθ(PKCθ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Rattus norvegicus (Rat) 蛋白激酶Cθ(PKCθ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Bos taurus; Bovine (Cattle) 蛋白激酶Cη(PKCη)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

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