基因克隆的本質是使目的基因在特定的條件下得到擴增和表達，而目的基因本身無法進行復制和表達、不易進入受體細胞、不能穩(wěn)定維持，所以就必須借助于“載體”及其“寄主細胞”來實現。

作為基因克隆的載體必須具備以下特性：

⑴載體必須是復制子。

⑵具有合適的篩選標記，便于重組子的篩選。

⑶具備多克隆位點（MCS），便于外源基因插入。

⑷自身分子量較小，拷貝數高。

⑸在宿主細胞內穩(wěn)定性高。

一、質粒載體

（一）質粒的生物學特性

（1）質粒是獨立于染色體以外的能自主復制的裸露的雙鏈環(huán)狀(少數為線形和RNA） DNA分子。

    廣泛從在于細菌細胞中，比病毒更簡單。在霉菌、藍藻、酵母和一些動植物細胞中也發(fā)現了質粒，目前對細菌的質粒研究得比較深入，特別是大腸桿菌的質粒。大腸桿菌的質粒主要有F質粒（F因子）、R質粒（抗藥性因子）和Col質粒（大腸桿菌素因子）三種。

（2）質粒的大小差異很大，zui小的只有1kb,只能編碼中等大小的2-3種蛋白質分子，zui大的達到200kb。

（3）質粒的生存在寄主細胞中“友好”地“借居”，離開了寄主它本身無法復制；同時質粒往往有宿主專一性，如大腸桿菌的復制起點不一定能在其它生物細胞中繁殖。

（4）質粒的復制類型一種質粒在宿主細胞中存在的數目稱為該質粒的拷貝數。據拷貝數將質粒分為兩種復制型：“嚴緊型”質粒（stigent plasmid）,拷貝數為1-3；“松弛型”質粒（relaxed plasmid）,拷貝數為10-60。不過即使是同一質粒，其拷貝數在不同的寄主細胞間和不同的生長環(huán)境也可能有很大的變化。

（5）質粒的不親和性 兩種親緣關系密切的不同質粒不能在同一宿主細胞中穩(wěn)定共存。載體質粒與受體的質粒應是不同的不親和群。

⑹ 質粒的轉移

    轉移性質粒，含有tra基因；能通過結合作用從一個細胞轉移到另一個細胞。

    非轉移性質粒，不含tra基因；可以為轉移性質粒所帶動轉移。

（7）質粒的存在形式有超螺旋、開環(huán)雙螺旋和線狀雙螺旋三種，