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上海研生生化試劑有限公司

免疫組化技術(shù)過(guò)程

時(shí)間:2015-8-12閱讀:349
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1. 固定

用4%的多聚甲醛固定液。對(duì)于冰凍切片,甲醛固定有時(shí)比冰凍丙酮好;但對(duì)于不同的組織和抗原,可選用不同的固定液。 有時(shí)候商品化的抗體會(huì)有比較適合而推薦的固定液,請(qǐng)于購(gòu)置前注意說(shuō)明書。

(1)BouinS固定液:飽和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其對(duì)組織的穿透力較強(qiáng),固定較好,結(jié)構(gòu)完整,但因偏酸,對(duì)抗原有一定損害,且組織收縮明顯,不適于組織標(biāo)本的長(zhǎng)期保存。

(2)PLP液:即高碘酸鈉-賴氨酸-多聚甲醛,適于固定石蠟切片。適于富含糖類組織,對(duì)超微結(jié)構(gòu)及許多抗原的抗原性保存較好。

2. 組織脫水、透明

時(shí)間不能太長(zhǎng),否則在切片時(shí)容易碎片,切不完整。

3. 切片時(shí)展片

有些組織在切片后難以在水中展開(kāi),這時(shí)可適當(dāng)?shù)卦谒屑尤霂椎我掖肌?/p>

4. 烤片

60℃ 30分鐘或37℃ 過(guò)夜,溫度太高或時(shí)間太長(zhǎng),抗原容易丟失。

5. 蠟塊及切片的保存

在4℃保存

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