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當(dāng)前位置:上海研生生化試劑有限公司>>技術(shù)文章>>中性粒細(xì)胞免疫復(fù)合物方法
可采集玻片凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)來檢測凝聚的中性粒細(xì)胞,不像紅細(xì)胞凝集試驗(yàn),粒細(xì)胞凝集程序不需加抗球蛋白試劑,僅依賴中性粒細(xì)胞自身能量凝聚。采用新生兒自身免疫性中性粒細(xì)胞減少癥母親血清進(jìn)行凝聚試驗(yàn),能分析中性粒細(xì)胞特異的靶抗原,包括NAl/NA2,NBl/NB2,NCL,NDl,NEt,9a。
幾種檢測抗體的方法可用于檢測抗完整中性粒細(xì)胞膜表面抗原的抗體。125L葡萄球菌蛋白和125L抗人IgG能同時(shí)檢測中性粒細(xì)胞表面的IgG。用熒光素標(biāo)記的抗*,以間接免疫熒光法也可檢測中性粒細(xì)胞抗體。臨床可疑自身免疫性中性粒細(xì)胞減少患者的血清中,抗中性粒細(xì)胞抗體的陽性率約為35%。陽性患者需做追加試驗(yàn),用高速離心法去除免疫復(fù)合物,并且用Fc受體相應(yīng)的單克隆抗體封閉免疫復(fù)合物,再檢測抗中性粒細(xì)胞抗體。
抗中性粒細(xì)胞抗體也能與正常骨髓髓樣前體細(xì)胞反應(yīng),嚴(yán)重的中性粒細(xì)胞減少癥患者血清易與不成熟的髓樣前體細(xì)胞反應(yīng),同時(shí)對成熟粒細(xì)胞也反應(yīng)。
鑒定特異抗中性粒細(xì)胞靶分子技術(shù)包括:蛋白質(zhì)印跡法、免疫沉淀法和抗原捕獲法,抗原捕獲法用單克隆抗體在聚丙乙烯珠或多孔反應(yīng)板內(nèi)固定中性粒細(xì)胞膜分子,這些固定的分子經(jīng)血清孵育,抗免疫球蛋試劑檢測特異抗體。
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