人類淋巴母細(xì)胞建株方法

l、4ml肝素抗凝血于離心管中，加入2ml RPMI 1640。

2、混勻后沿管壁緩慢加到預(yù)置有4ml淋巴細(xì)胞分離液的液面上靜置30min。

3、1500rpm，15min，吸取白細(xì)胞層（第二層）于另一離心管中。

4、加RPMI 1640 5ml洗滌白細(xì)胞兩次。

5、將白細(xì)胞接種至1ml RPMI 1640培養(yǎng)基中，加入10μl環(huán)胞霉素和100μl的EB（EB病毒）液，混勻。

6、水浴搖床，40次/分，37℃，3hr。

7、1500rpm，15min。將細(xì)胞接種至1ml培養(yǎng)基中（內(nèi)含*1mM／ml）加入10μl環(huán)胞霉素，輕輕混勻，37℃培養(yǎng)。

8、5天后觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)化和生長情況，決定是否半量換液。一般半量換液l—2次，并維持環(huán)胞霉素的濃度。

9、待轉(zhuǎn)化細(xì)胞數(shù)量明顯上升，并出現(xiàn)細(xì)胞團塊后，可轉(zhuǎn)入25ml細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，加1—2ml培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)10—15天，一般每隔3—4天觀察一次，決定是否換液，傳代。

10、細(xì)胞生長達(dá)一定數(shù)量后凍存，凍存前應(yīng)進(jìn)行核型分析和存檔。

英文名稱 Rattus norvegicus (Rat) 轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員6(TRPM6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格： 48T/96T
英文名稱 Mus musculus (Mouse) 轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4(TRPM4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格： 48T/96T
英文名稱 Rattus norvegicus (Rat) 轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4(TRPM4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格： 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員1(TRPM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格： 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格： 48T/96T
細(xì)胞英文名稱 Mus musculus (Mouse) 轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格： 48T/96T
英文名稱 Bos taurus; Bovine (Cattle) 轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格： 48T/96T