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組織化學(xué)的細(xì)胞標(biāo)本檢查

時間:2015-8-5閱讀:464
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一、培養(yǎng)細(xì)胞

1.貼壁生長的細(xì)胞

在細(xì)胞培養(yǎng)接種前,把涂有黏附劑的小蓋片放人培養(yǎng)板中,接種后的細(xì)胞自然爬在小蓋片上生長。取材時,把小蓋片用預(yù)熱的磷酸鹽緩沖液(PBS)輕輕沖洗、瀝干后即可加入固定液。

2.懸浮生長的細(xì)胞

制備細(xì)胞濃度為2×105·6 細(xì)胞/ml懸液,取50~100ul,加入離心涂片機內(nèi),1000r/min離心2分鐘,細(xì)胞即可均勻分布于已涂黏附劑的載玻片上。

3.印片法

主要應(yīng)用于活組織標(biāo)本檢查和剖檢標(biāo)本取材。新鮮標(biāo)本做一剖面,充分暴露病變區(qū),將載玻片輕輕壓于病變區(qū),脫落的細(xì)胞 便黏附在玻片上。隨后立即將載玻片浸入細(xì)胞固定液內(nèi)5~10分鐘,取出后自然干燥,低溫保存?zhèn)溆?。其?yōu)點是簡便省時,細(xì)胞抗原保存較好;缺點是細(xì)胞分布不均勻,玻片上細(xì)胞有重疊,影響觀察效果。

二、涂片法

臨床穿刺獲取含有細(xì)胞的液體(腹水,胸水和心包液)或氣管、宮頸等分泌物可直接涂片,如果液體太多,可加入1-2ml Hanks液(或細(xì)胞培養(yǎng)液)輕輕混勻,500r/min離心5~10分鐘,棄上清液,制成細(xì)胞懸液(2×106 細(xì)胞/ml),使用細(xì)胞離心涂片機或吸一滴于載玻片上,輕涂,干燥后固定。

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