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蛋白質(zhì)純化的方法選擇

時(shí)間:2015-10-16閱讀:424
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     隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,越來越多的科研人員熟練掌握了分子生物學(xué)的各種試驗(yàn)技術(shù),并研制成套試劑盒,使基因克隆表達(dá)變得越來越容易。但分子生物學(xué)的上游工作往往并非是zui終目的,分子克隆與表達(dá)的關(guān)鍵是要拿到純的表達(dá)產(chǎn)物,以研究其生物學(xué)作用,或者大量生產(chǎn)出可用于疾病治療的生物制品。相對(duì)與上游工作來說,分子克隆的下游工作顯得更難,蛋白純化工作非常復(fù)雜。

蛋白質(zhì)純化的方法選擇

    隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,越來越多的科研人員熟練掌握了分子生物學(xué)的各種試驗(yàn)技術(shù),并研制成套試劑盒,使基因克隆表達(dá)變得越來越容易。但分子生物學(xué)的上游工作往往并非是zui終目的,分子克隆與表達(dá)的關(guān)鍵是要拿到純的表達(dá)產(chǎn)物,以研究其生物學(xué)作用,或者大量生產(chǎn)出可用于疾病治療的生物制品。相對(duì)與上游工作來說,分子克隆的下游工作顯得更難,蛋白純化工作非常復(fù)雜,除了要保證純度外,蛋白產(chǎn)品還必須保持其生物學(xué)活性。

    純化工藝必須能夠每次都能產(chǎn)生相同數(shù)量和質(zhì)量的蛋白,重復(fù)性良好。這就要求應(yīng)用適應(yīng)性非常強(qiáng)的方法而不是用能得到純蛋白的方法去純化蛋白。在實(shí)驗(yàn)室條件下的好方法卻可能在大規(guī)模生產(chǎn)應(yīng)用中失敗,因?yàn)楹笳咭笠?guī)?;?,且在每日的應(yīng)用中要有很好的重復(fù)性。本文綜述了蛋白質(zhì)純化的基本原則和各種蛋白純化技術(shù)的原理、優(yōu)點(diǎn)及局限性,以期對(duì)蛋白純化的方法選擇及整體方案的制定提供一定的指導(dǎo)。

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