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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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液體樣本總蛋白提取試劑盒簡(jiǎn)便,效率高

時(shí)間:2023/1/6閱讀:484
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液體樣本總蛋白提取試劑盒簡(jiǎn)便,效率高


描述:

本試劑盒能夠在15分鐘內(nèi)對(duì)液體樣品中的蛋白進(jìn)行提取濃縮,或脫鹽、脫去垢劑、脫還原劑等。適用于各種液體樣品(10µL~1L),如蛋白溶液、胞漿胞核蛋白提取液、細(xì)胞或微生物培養(yǎng)基上清液、血液、尿液、腦脊液等各種體液;也適于從細(xì)胞懸液提取總蛋白。蛋白回收率95-100%,遠(yuǎn)高于經(jīng)典的丙酮或三氯醋酸沉淀法,且可有效去除樣品中的脂質(zhì),不影響后續(xù)SDS-PAGE和Western Blot等生物實(shí)驗(yàn)。可用1.5ml離心管微量提取也可大規(guī)模制備,簡(jiǎn)便高效。


組成和保存:

濃縮試劑50ml,適用100x 100ml次濃縮提取。4℃保存 12個(gè)月有效


適用樣品:

1. 液體樣品如蛋白溶液、胞漿胞核蛋白提取液、細(xì)胞或微生物培養(yǎng)基上清液、血液、尿液、腦脊液等各種體液。2. 原代或傳代細(xì)胞懸液,可按液體方式提取總蛋白。


注意

1. 可室溫操作。1 mg/ml總蛋白可被有效沉淀,更低濃度的蛋白可加入白蛋白做載體幫助沉淀??捎行コ后w樣品中的鹽(1M)、還原劑(1%巰基乙醇


或DTT)、去垢劑(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40、油脂等。如果上述成分濃度過(guò)高,用水稀釋后進(jìn)行提取。干燥蛋白沉淀可4℃或-20℃長(zhǎng)期保


存。


2. 血漿蛋白或疏水蛋白溶解較慢,反復(fù)數(shù)次95℃煮并加以-20℃凍融可助溶。必要時(shí)4℃溶解過(guò)夜,或用2% SDS溶解沉淀,95℃煮,然后離心去除不


溶解物。


3. 如定量蛋白應(yīng)使用不含溴酚藍(lán)的凝膠上樣緩沖液溶解沉淀,蛋白定量后再加入溴酚藍(lán)。


4. 提取培養(yǎng)細(xì)胞總蛋白:用蒸餾水或1% SDS制備一定體積的細(xì)胞懸液,振蕩裂解細(xì)胞,然后執(zhí)行上述液體樣品蛋白提取程序。


5. 實(shí)體組織的蛋白提取可使用P1250實(shí)體組織和細(xì)胞蛋白抽提試劑盒。


6. 提取試劑有刺激性,一旦接觸立即用水清洗。


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