ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，Pγ Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的范圍一般較寬，曲線(xiàn)zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線(xiàn)一般呈S形，其頭、尾部曲線(xiàn)趨于平坦，Pγ Elisa kit中央較呈直線(xiàn)的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

Pγ Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過(guò)程稱(chēng)為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。Pγ Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，Pγ Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線(xiàn)照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴(lài)氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，Pγ Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類(lèi)物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開(kāi)蓋置冰箱過(guò)夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

Pγ Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyB908Hu    人聚集蛋白聚糖(AGC)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Aggrecan (AGC)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB909Hu    人p53上調(diào)凋亡調(diào)節(jié)因子(PUMA)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for p53 Upregulated Modulator Of Apoptosis (PUMA)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB921Hu    人血小板親和蛋白1(PKP1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Plakophilin 1 (PKP1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB910Hu    人*7(KLK7)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Kallikrein 7 (KLK7)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB925Hu    人Smad同源物4(Smad4)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 4 (Smad4)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB919Hu    人血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 2 (ANGPTL2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB928Hu    人干擾素γ誘導(dǎo)單核因子(MIγ)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Monokine InduHZd By Interferon Gamma (MIg)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB912Hu    人防御素α5(DEFα5)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Defensin Alpha 5, Paneth HZll Specific (DEFa5)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB914Hu    人甲酰肽受體2(FPR2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Formyl Peptide ReHZptor 2 (FPR2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB915Hu    人布魯東氏*激酶(Btk)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Bruton'S Tyrosine Kinase (Btk)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB923Hu    人丙酮酸脫氫酶β(PDHβ)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Beta (PDHb)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB930Hu    人脫鐵轉(zhuǎn)鐵蛋白(apoTf)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Apotransferrin (apoTf)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB932Hu    人甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for GlyHZraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB933Hu    人組織蛋白酶S(CTSS)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Cathepsin S (CTSS)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB802Hu    人白介素32(IL32)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Interleukin 32 (IL32)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB934Hu    人*豐富α2-糖蛋白1(LRG1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1 (LRG1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB935Hu    人肌腱蛋白X(TNX)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Tenascin X (TNX)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB937Hu    人芳香胺-N-乙?；D(zhuǎn)移酶(AANAT)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Arylalkylamine-N-AHZtyltransferase (AANAT)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB941Hu    *D(IgD)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Immunoglobulin D (IgD)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB944Hu    人膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Annexin A2 (ANXA2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB945Hu    人表皮調(diào)節(jié)素(EREG)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Epiregulin (EREG)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB947Hu    人頂體蛋白(ACR)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Acrosin (ACR)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml