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VE Elisa Kit固相載體分析

時(shí)間：2017/3/30閱讀：949

VE Elisa Kit可溶性抗原或抗體吸附于固相載體而成為不溶形式，這是進(jìn)行酶標(biāo)記測(cè)定的基本條件。
許多物質(zhì)可作為固相載體，如纖維素、交聯(lián)右旋糖苷、瓊脂糖珠、聚丙烯、聚苯乙烯、聚乙烯及聚氯乙烯等等。但在ELISA中zui常用的是聚苯乙烯或聚氯乙烯微量反應(yīng)板及塑料管。
由于微量反應(yīng)板所用試劑量少，操作方便，適合于大規(guī)模應(yīng)用。國(guó)產(chǎn)聚苯乙烯微量反應(yīng)板目前已大量應(yīng)用于ELISA測(cè)定，并且獲得了滿意的結(jié)果。但每批微量反應(yīng)板對(duì)抗原或抗體蛋白質(zhì)的吸附性能是有顯著差別的。實(shí)驗(yàn)證明，吸附效果似乎與塑料的類型及其表面性質(zhì)有關(guān)。特別是塑料制品在加工過程中因工藝不同或受其他因素的影響而造成吸附性能的差異，甚至*喪失吸附能力。
因此，VE Elisa Kit對(duì)每批制品在使用前，必須經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室鑒定，鑒定的方法和標(biāo)準(zhǔn)是對(duì)每批購置的微量反應(yīng)板或塑料管抽樣，用0.2ug/ml純化的正常人IgG進(jìn)行包被，經(jīng)洗滌后加酶標(biāo)記抗人球蛋白進(jìn)行反應(yīng)，再經(jīng)孵育洗滌，加底物顯色終止反應(yīng)后，逐孔在酶標(biāo)比色計(jì)中測(cè)定其消光值、光密度（O.D值）。一般認(rèn)為全板中每?jī)煽组gO.D值的誤差不超過10%為合格。如果中間孔與四周孔O.D值相差太大，或者反應(yīng)板的這一邊與另一邊凹孔的O.D值相差大，均不合格。
此外，還要檢查陽性和陰性參考血清O.D值是否有明顯差別。一般要求有10倍左右的差異為合格，微量反應(yīng)板或塑料管在使用前并不一定通過特殊處理。VE Elisa Kit用蒸餾水沖洗即可應(yīng)用。

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