紅細(xì)胞衍生核因子2樣蛋白2(NFE2L2)ELISA試劑盒洗滌方法：

1. 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時(shí)，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

1.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體，甩干，每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。

3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時(shí)。

5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng)，但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí)，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測(cè)程序。

9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1)

小鼠噬酸性粒細(xì)胞趨化因子(mouse Eotaxin)

小鼠促紅細(xì)胞生成素(mouse EPO)

小鼠紅細(xì)胞生成素受體(mouse EPOR)

小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(mouse ECP)

小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽-78(mouse ENA-78)

小鼠血管內(nèi)皮抑素(mouse Endostatin)

小鼠腎上腺素(mouse EPI)

小鼠內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶(mouse eNOS)

小鼠雌二醇(mouse E2)

小鼠促卵泡素(mouse FSH)

小鼠凋亡相關(guān)因子(mouse Fas)

小鼠凋亡相關(guān)因子配體(mouse Fas Ligand)

小鼠酸性成纖維生長(zhǎng)因子(mouse a-FGF)

小鼠堿性成纖維生長(zhǎng)因子(mouse b-FGF/FGF-2)

小鼠Fibronectin（mouse Fibronectin）

小鼠Flt3(mouse Flt3)

小鼠Flt3配體(mouse Flt3 Ligand)

小鼠纖維連結(jié)蛋白(mous FN)

小鼠Fractalkine（mouse Fractalkine）

小鼠X(mouse FX)

小鼠纖維蛋白原(mouse Fibrinogen)

小鼠Foxp3(mouse Foxp3)

小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9)

小鼠胃泌素(mouse Gastrin)

小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)

小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1)

小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon)

小鼠GRO(mouse GRO)

小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞衍化營(yíng)養(yǎng)因子(mouse GDNF)

小鼠生長(zhǎng)因子(mouse GH)

小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子3(mouse GATA3)

小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子4(mouse GATA4)