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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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文多靈含量測(cè)試盒測(cè)定步驟

時(shí)間:2022/1/18閱讀:696
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文多靈含量測(cè)試盒測(cè)定步驟:

1.加樣

1.除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣,不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

ARMCX3ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX3抗體

ARMCX1ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX1抗體

ARMCX2ARM重復(fù)X連鎖蛋白ARMCX2抗體

Apg10自噬相關(guān)蛋白10抗體

Aminoacylase 1氨基酰化酶1抗體

Adipose Triglyceride Lipase脂肪甘油三酯脂酶抗體

phospho-AMPK alpha-1 (Thr172)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

Amphiregulin雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長(zhǎng)因子)抗體

phospho-AQP2(Ser264)磷酸化水通道蛋白2抗體

AXL粘附相關(guān)激酶抗體

phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703)磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體

phospho-AKT1 + AKT2 + AKT3 (Thr308+Thr309+Thr305)磷酸化蛋白激酶B抗體

phospho-AQP2(Ser269)磷酸化水通道蛋白2抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743)磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

phospho-AKT1(Ser129)磷酸化蛋白激酶B抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser198)磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

phospho-ATF4 (Ser245)磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體

phospho-Androgen Receptor (Ser213)磷酸化雄激素受體抗體


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