鹽酸(CH)ELISA試劑盒使用目的:
本試劑盒用于飼料、魚(yú)、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),血清和尿樣中鹽酸(CH)殘留的定量檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA 方法,在微孔板包被有鹽酸(CH)偶聯(lián)抗原,加入鹽酸(CH)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離鹽酸(CH)與微孔條上預(yù)包被的鹽酸(CH)偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗鹽酸(CH)抗體酶標(biāo)記物,用TMB 底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),吸光值與樣品中鹽酸(CH)含量成反比,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中鹽酸(CH)的含量。
注意事項(xiàng)
使用試劑盒前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)。
不要使用過(guò)期試劑盒。
試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時(shí)。
標(biāo)準(zhǔn)品中含有鹽酸(CH),使用時(shí)應(yīng)特別注意,操作時(shí)應(yīng)帶手套。
終止液中含有硫酸,使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。
不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
稀釋樣本時(shí)必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果
混合試劑時(shí)應(yīng)避免起泡。
鹽酸(CH)ELISA試劑盒分析步驟
預(yù)先進(jìn)行編號(hào),標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,進(jìn)行雙孔檢測(cè)
取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(20×)稀釋成工作液(蒸餾水或離子水稀釋)
在B0孔中加入50μl0.0 ng/ ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液
在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液
在各樣品孔中加入50μl樣品溶液
在所有孔中加入50μl的鹽酸(CH)抗體酶結(jié)合物
輕輕晃動(dòng)反應(yīng)板幾秒鐘。
37℃溫浴30min (溫浴過(guò)程中不時(shí)輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)
甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,zui后一次應(yīng)在吸水紙上拍打*除去孔中液體。
反應(yīng)
洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50μl顯色液A,再加 50μl顯色液B;輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之*混勻
37℃溫浴10min
每孔中加入50μl終止液,混勻
鹽酸(CH)ELISA試劑盒在450nm下檢測(cè)吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。