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COS-6細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞說明書

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所  在  地上海市

更新時間:2021-03-29 12:46:00瀏覽次數(shù):648次

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COS-6細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞說明書上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:Weigert蘇木素染色液 2×500ml 瓶

Clobetasol propionate 丙酸倍他索 1g 瓶

Rifampicin 250mg 支

DM130大孔吸附樹脂 500g 瓶

Umbelliferone 7-羥基豆素 93-35-6 20mg

Gum tragacanth powder 黃蓍樹膠粉

下列是產(chǎn)品的訂購信息:

產(chǎn)品名稱

COS-6細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞說明書

英文名稱

COS-6 cells, Africa green monkey kidney cells

貨號

EY-X64135

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
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培養(yǎng)操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
實(shí)驗要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

96孔PCR硅膠封板膜 10個/包  包

Estrone 雌酚酮 53-16-7  20mg

Weigert蘇木素染色液 2×500ml  瓶

Clobetasol propionate 丙酸倍他索 1g  瓶

Rifampicin 250mg  支

DM130大孔吸附樹脂 500g  瓶

Umbelliferone 7-羥基豆素 93-35-6  20mg

Gum tragacanth powder 黃蓍樹膠粉 100g  瓶

0.4%呂氏堿性美藍(lán)染色液 100ml  瓶

Urea 尿素 500g  瓶

PhosphoMycin disodiuM salt 鈉 5g  瓶

Magnesium chloride, hexahydrate 化鎂六水 100g  瓶

COS-6細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞說明書包含氧化還原酶的WW域抗原WWOX (WW domain-containing oxidoreductase) 0.5mg

X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗原XIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein) 0.5mg

XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗原XAF1(XIAP-associated factor 1) 0.5ml

X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白/細(xì)胞堿基切除修復(fù)基因抗原XRCC1(X-ray Repair Cross Complementing 1) 0.5mg

胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗原ZO-1 peptide 0.5mg

血管緊張素Ⅱ受體(抗原)Angiotensin II receptor(Ang II ) 0.5mg

ARC(多肽抗原)Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) 0.5mg

蛋白激酶C(多肽抗原)Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 0.5mg

腎上腺素能受體β1(抗原)Beta1-adrenergic receptor 0.5mg

膜粘連蛋白-5(抗原)Annexin V 0.5mg

水通道蛋白-4(抗原)AQP4(aquaporin Protein-4) 0.5mg

細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

 

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