產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human TGF-β1 protein

產(chǎn)品中文名稱：重組人轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）

規(guī)格：5 μg/100 μg/500 μg

貨號：EY-01X8632
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢:

分子:TGF-β1

標(biāo)簽:無標(biāo)簽

種屬:人

序列:氨基酸序列來源于： active form of人源/rhesus/canine TGFβ1 (NP_000651.3)。(Ala 279-Ser 390)表達(dá)的蛋白片段。人源, 恒河猴和犬序列:相同。

活性:檢測其抑制貂肺上皮細(xì)胞（Mv-1-lu）增殖的能力，ED50 為 0.04-0.2 ng/ml。

蛋白長度：重組人/獼猴/犬類的TGF-β1由112個(gè)氨基酸組成，理論分子量為12.8 KDa。在還原性和非還原性SDS-PAGE中顯示的條帶分別為13和動?動

背景

轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)是指兩類多肽類生長因子,轉(zhuǎn)化生長因子-α和轉(zhuǎn)化生長因子-β。轉(zhuǎn)化生長因子-α是由巨噬細(xì)胞,腦細(xì)胞和表皮細(xì)胞產(chǎn)生,可誘導(dǎo)上皮發(fā)育。人類轉(zhuǎn)化生長因子－β有三個(gè)亞型,TGF-β1,TGF-β2,TGF-β3。轉(zhuǎn)化生長因子-β (Transforming growth factor beta, TGF-β)是一多功能蛋白質(zhì)，可以影響多種細(xì)胞的生長，分化、細(xì)胞凋亡及免疫調(diào)節(jié)等功能。轉(zhuǎn)化生長因子-β屬于轉(zhuǎn)化生長因子-β超家族蛋白。轉(zhuǎn)化生長因子-β可以結(jié)合到細(xì)胞表面的轉(zhuǎn)化生長因子-β受體結(jié)合而激活其受體。轉(zhuǎn)化生長因子-β受體是激酶受體。其信號傳遞可以通過SMAD信號通路和/或DAXX信號通路。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

AQP-2 (aquaporin Protein-2 0.5mgAQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)

CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

EFNA5重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

CD79B Protein Rat 重組大鼠 CD79B / B29 蛋白

IL36A重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白 Protein

小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai neuophil / cenosome aibody (ACA) ELISA Kit 人抗中性粒/中心體抗體(ACA)檢測試劑盒

Humanai-OJ-aibody，OJ/IleRSELISAKit 人OJ抗體/抗異亮氨酰NA合成酶抗體(OJ/IleRS)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforABeta1-42(Humanamyloidbetapeptide1-42)ELISAKit人β淀粉樣蛋白1-42

乙醇福爾馬林固著液(Formalin-Alcoholic)50毫升

MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit小鼠N-乙?；?span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯(AcSDKP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

血清低密度脂蛋白（LDL）測試盒   Two semi test case

血清高密度脂蛋白（HDL）測試盒   HCV test kit

葡萄糖（Glu）測試盒   Surface aigen (enzymatic method) test case

（半自動/手工）   A test box

大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)檢測試劑盒 ，英文名： SP-A ELISA Kit

Porcine soluble P selectin (sP-S 豬可溶性P選擇素(sP-S

豬特定基因序列(Porcine)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMAP-2(Humanmicrotubule-associatedprotein2)ELISAKit人微管相關(guān)蛋白2

體液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(過氧亞硝基陰離子)20次

ELISAKitIGFBP-3胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3

重組人轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）EFNA5重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

AQP-2 (aquaporin Protein-2 0.5mgAQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)

IL36A重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白 Protein

CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

CD79B Protein Rat 重組大鼠 CD79B / B29 蛋白