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當前位置:上海一研生物科技有限公司>>原代細胞>>人原代細胞>> 人腎臟微血管內(nèi)皮細胞
貨號 | EY-XY4693 | 組織來源 | 腎 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
產(chǎn)品名稱:人腎臟微血管內(nèi)皮細胞
英文名稱:Human Renal Microvascular Endothelial Cells
組織來源:腎
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
人腎臟微血管內(nèi)皮分離自腎臟;腎臟是人體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水分及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎臟內(nèi)部的結(jié)構,可分為腎實質(zhì)和腎盂兩部分。在腎縱切面可以看到,腎實質(zhì)分內(nèi)外兩層:外層為皮質(zhì),內(nèi)層為髓質(zhì)。腎皮質(zhì)位于腎實質(zhì)表層,富含血管,新鮮時呈紅褐色,由一百多萬個腎單位組成。每個腎單位由腎小體和腎小管所構成,部分皮質(zhì)伸展至髓質(zhì)錐體間,成為腎柱。腎髓質(zhì)位于腎皮質(zhì)的深面,血管較少,色淡紅,為10-20個錐體所構成。腎錐體在切面上呈三角形。錐體底部向腎凸面,向腎門,錐體主要組織為集合管,錐體稱腎乳頭,每一個乳頭有10-20個乳頭管,向腎小盞漏斗部開口。在腎竇內(nèi)有腎小盞,為漏斗形的膜狀小管,圍繞腎乳頭。腎錐體與腎小盞相連接。每腎有7~8個腎小盞,相鄰2~3個腎小盞合成一個腎大盞。每腎有2~3個腎大盞,腎大盞匯合成扁漏斗狀的腎盂。腎盂出腎門后逐漸縮窄變細,移行為輸尿管。腎單位是腎臟結(jié)構和功能的基本單位。腎小體包括腎小球和腎小囊。腎小體內(nèi)有一個毛細血管團,稱為腎小球,腎小球是個血管球。它由腎動脈分支形成。腎小球外有腎小囊包繞。腎小囊分兩層,兩層之間有囊腔與腎小管的管腔相通。腎小管匯成集合管。若干集合管匯合成乳頭管,尿液由此流入腎小盞。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7~9微米,數(shù)量極多,成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細胞及一薄層基膜組成,厚約0.5微米。基膜外面有薄層結(jié)締組織,其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。細的毛細血管由一個內(nèi)皮細胞圍成管腔,較粗的毛細血管由2~3個內(nèi)皮細胞圍成。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的毛細血管,內(nèi)皮細胞間為縫隙連接(縫隙寬150埃),稱連續(xù)毛細血管;分布于內(nèi)分泌腺、腎臟等處的毛細血管,除有縫隙連接外,細胞本身有許多小孔,(孔徑800~1000埃),稱有孔毛細血管;分布于肝、脾、骨髓及某些內(nèi)分泌腺的毛細血管,管腔擴大,稱血竇。毛細血管的管壁薄、通透性大、管徑細(8~10微米)、數(shù)量多、血流速度慢,這些特點使其成為血液與組織液進行物質(zhì)交換的場所,又稱交換血管。血竇(sinusoid)由毛細血管管腔擴大而成,竇壁的一般結(jié)構與毛細血管壁相同,由單層內(nèi)皮細胞構成,內(nèi)皮細胞膜上有窗孔。不同器官的竇壁結(jié)構各有差別。脾血竇的內(nèi)皮細胞間有較寬裂隙;肝血竇內(nèi)皮細胞是不連續(xù)的,有較寬的細胞隙(0.1~0.5微米);肝、脾血竇的基膜不完整或無基膜,通透性比毛細血管大,較大的蛋白質(zhì)和血細胞可以通過。肝血竇壁內(nèi)有枯否細胞,脾血竇內(nèi)外有巨噬細胞,這兩種細胞都有吞噬能力,可吞噬清除血液中的異物、細菌等有害物質(zhì),是機體單核巨噬細胞系統(tǒng)的重要組成分。某些內(nèi)分泌腺的血竇有連續(xù)的基膜。
實驗室分離的人腎臟微血管內(nèi)皮采用膠原酶消化,結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的人腎臟微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):內(nèi)皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人腎臟微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
取材→分離→培養(yǎng)和維持
1、取材
人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件,直接影響細胞的體外培養(yǎng)。
(1) 取材的基本要求
① 取材要注意新鮮和保鮮
② 應嚴格無菌
③ 防止機械損傷
④ 去除無用組織和避免干燥
⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等
⑥ 作好記錄
2、分離
人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密,不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖,必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開,使細胞解離出來。
(1)懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
(2)實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
① 機械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
② 消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
大鼠末端補體復合體C5b-9(C5b-9)檢測試劑盒 ,英文名: C5b-9 ELISA Kit
Monkey ierleukin 1 (IL-1) ELISA Kit白介素1(IL-1)檢測試劑盒
RatComplemefragme4a,C4aELISAKit 大鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforA1cELISAKit大鼠糖化血紅蛋白A1c
細胞甘油-3-0酸脫氫酶(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase)總活性比色法定量檢測試劑盒20次
RatsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISAKit大鼠可溶性凋亡相關因子(sFAS/Apo-1)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
AMIGO2重組人 AMIGO2 蛋白 Protein
streptomycin/BSA 偶聯(lián)牛血清白蛋白 2mgstreptomycin/BSA 偶聯(lián)牛血清白蛋白
TACSTD2重組人 TROP2 / TACSTD2 蛋白 Protein
IGFLR1 Protein Human 重組人 IGFLR1 / TMEM149 蛋白 (Fc 標簽)
TGFBR2 Protein Human 重組人 TGFBR2 蛋白 (His & Fc 標簽)
streptomycin/BSA 偶聯(lián)牛血清白蛋白 2mgstreptomycin/BSA 偶聯(lián)牛血清白蛋白
IGFLR1 Protein Human 重組人 IGFLR1 / TMEM149 蛋白 (Fc 標簽)
AMIGO2重組人 AMIGO2 蛋白 Protein
TGFBR2 Protein Human 重組人 TGFBR2 蛋白 (His & Fc 標簽)
TACSTD2重組人 TROP2 / TACSTD2 蛋白 Protein
豚鼠乙型肝病毒表面抗體(HBsAb)檢測試劑盒 ,英文名: HBsAb ELISA Kit
Human protein tyrosine phosphatase (PTP/PTPase/CD148) ELISA Kit 人蛋白酪0酸酶(PTP/PTPase/CD148)檢測試劑盒
MonkeyEndothelin1,ET-1ELISAKit內(nèi)皮素1(ET-1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBMP-4ELISAKit大鼠骨成型蛋白4
細菌明膠瓊脂平板50個
rabbitmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISAKit兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
人腎臟微血管內(nèi)皮細胞水飽和酚 10x250ml
Phenol,WaterSaturated,pH5.3
0酰二肽 10x250ml
Phosphoramidon
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