① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔骨外膜細胞

英文名稱：Rabbit Periosteum Cells

組織來源：骨

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

兔骨外膜分離自骨外膜組織；骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質(zhì)外面包著的那層膜；在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有一種能夠生成骨的細胞，稱為成骨細胞，這種細胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞，稱為破骨細胞。這兩種細胞作用相反又相互依據(jù)。成骨細胞像建筑工人，不停地生成新的骨組織，破骨細胞則像維修工人，不停地清除老化、死亡、破碎的骨結構，并且還負責拆除“違章建筑"，就是除去不需要的多余的骨組織，從而使骨的整體結構更符合生物力學的需要。正常情況下，兩種細胞之間處于動態(tài)的平衡之中，完成骨的生長發(fā)育的新陳代謝。骨折之后，成骨細胞先啟動，從而促使新骨痂的生成，即骨折的愈合。但是，股痂只是恢復了骨的連續(xù)性，往往不符合生物力學的需要，改建塑形的過程則必須有破骨細胞的參與才能完成。

實驗室分離的兔骨外膜采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔骨外膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔骨外膜體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)檢測試劑盒 ，英文名： ACTH ELISA Kit

Mouse 16 alpha hydroxy esone 1 (16- a OHE-1) ELISA Kit 小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)檢測試劑盒

ELISA 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2)  進口分裝

CLIAKitforLIFRELISAKit大鼠白血病抑制因子受體

通用型ECL免疫印跡化學發(fā)光溶液A液：50毫升B液：50毫升1000cm2

ELISAKit1,3-βDglucosidase雞1,3-βD葡葡糖苷酶

FSTL1重組小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP)

CGB5重組人 CGB5 蛋白 Protein

IFNG Protein Human 重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白

EGF Protein Canine 重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白

甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP)

IFNG Protein Human 重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白

FSTL1重組小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

EGF Protein Canine 重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白

CGB5重組人 CGB5 蛋白 Protein

小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human gasic inhibitory polypeptide (GIP) ELISA Kit 人胃抑素(GIP)檢測試劑盒

Humancomplexedprostatespecificaigen,cPSAELISAKit 人復合前列腺特異性抗原(CPSA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanC-ReactiveProtein,CRP檢測試劑盒人C反應蛋白(CRP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織CSK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

HumanProtamine1,PRM1ELISAKit人1(PRM1)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔骨外膜細胞糖元染液   Pap stain (exfoliated cell staining)

蘇木素染液   Fast HE tissues and exfoliated cells of dye

伊紅染液   Gram stain

H-E染液   Acid fast stain

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用