大鼠小腸粘膜上皮細胞細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Saos-2，人成骨肉瘤細胞

Caco-2，人結(jié)直腸腺癌細胞

NCI-N87 [N87]人胃癌細胞

MGC80-3（MGC-803）人胃癌細胞

EC109，人食管癌細胞

HGC-27人胃癌細胞

AGS人胃腺癌細胞

U251人膠質(zhì)瘤細胞

THP-1人單核白血病細胞

HuH-7人肝癌細胞

RBE, 人肝膽管癌細胞

MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞

QGY-7701, 人肝癌細胞

PANC-1, 人胰腺癌細胞

U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞

Hep G2, 人肝癌細胞系

PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤

Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞

QBC-939, 人膽管癌細胞

B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞

SGC-7901, 人胃腺癌細胞系

SK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞

SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細胞

A549, 人肺癌細胞系

A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株