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小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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更新時(shí)間:2025-01-03 20:30:40瀏覽次數(shù):671次

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產(chǎn)品名稱:小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: Hsp-70 ELISA Kit

規(guī)格:96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。

小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測(cè)抗體、
(四)競(jìng)爭(zhēng)法。
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽(yáng)性。
二、間接法(檢測(cè)未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽(yáng)性。

HL    重組人 CHL- 蛋白 (His 標(biāo)簽)    CHL
B2M    重組人 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 (His 標(biāo)簽)    B2M
CSH    重組人 Placental Lactogen / CSH 蛋白 (His 標(biāo)簽)    CSH
CD97    重組人 CD97 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    CD97
LILRB3    重組人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 (His 標(biāo)簽)    LILRB3
LUM    重組人 Lumican / LUM 蛋白 (His 標(biāo)簽)    LUM
LCN    重組人 LCN / VEGP / Lipocalin- 蛋白 (His 標(biāo)簽)    LCN
MANF    重組人 MANF / ARMET 蛋白 (His 標(biāo)簽)    MANF
CDH5    重組人 VE-Cadherin / CD44 / CDH5 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)    CDH5
CRTAM    重組人 CRTAM 蛋白 (His 標(biāo)簽)    CRTAM
LRP    重組人 LRP / A2MR / CD9 蛋白 (aa 786-65)    LRP
ICOSLG    重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His 標(biāo)簽)    ICOSLG
FCRL    重組人 FCRL / FCRH 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FCRL
ANGPT2    重組人 ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    ANGPT2
METTL    重組人 METTL 蛋白 (His 標(biāo)簽)    METTL326-20    一站式平末端克隆試劑盒    20 次
一站式 RNA 電泳套裝    0 次    
克必隆 RACE 試劑盒    0 次    
鮭魚精 DNA    00mg    
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格動(dòng)物上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子    5mL 
DNA  2-Mercaptoethanol(2- 乙醇 )    50mL    
40629-5    0雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V- 熒光素 555·7-AAD)    50 次

20654D-20    Southern Marker DL2000(DIG)    20 次
石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒    30 次    
動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒    00 次    
    g    
    250mg    
CAS779-8-6    氯化鎂六水    00g
30533-0    木瓜蛋白酶抑制劑溶液,0.5 mg/mL    0mL
柱式尿液 DNAout    50 次    

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