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大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)

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更新時間:2025-01-06 16:21:14瀏覽次數(shù):658次

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大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)

Rat Kidney PrimaCell5: Normal Renal Artery Endothelial Cells

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大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒【Rat Kidney PrimaCell5: Normal Renal Artery Endothelial Cells】
     大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)腎是脊椎動物的一種器官,屬于泌尿系統(tǒng)的一部分,負責(zé)過濾血液中的雜質(zhì)、維持體液和電解質(zhì)的平衡,后產(chǎn)生尿液經(jīng)由后續(xù)管道排出體外;同時也具備內(nèi)分泌的功能以調(diào)節(jié)血壓。在人體中,正常成人具備兩枚腎臟,位于腰部兩側(cè)后方。其中,大鼠腎上皮細胞分離自正常大鼠腎組織,腎上皮細胞主要功能:()腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸,并排泌非營養(yǎng)物質(zhì)進入終尿。(2)細胞能分泌炎癥介質(zhì)如細胞因子和趨化因子,通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應(yīng)。(3)是許多先天性疾病、代謝性疾病和炎癥的主要損傷部位。(4)在移植腎炎癥和新月體腎炎中上皮細胞表達IL-2R alpha和MHC-Ⅱ類抗原,參與腎免疫損傷的發(fā)生。大鼠腎上皮細胞傳5代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 雖然大鼠腎上皮組織機械韌性很強,但利用本公司試劑盒中提供的腎上皮組織分離體系來分離,EDTA/EGTA處理過的薄的腎上皮組織片能使腎上皮細胞的一些功能特性發(fā)生改變,從而將腎上皮細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠腎上皮細胞。本體系提供了佳的組織分離條件,分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外,本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系,可以大程度地降低所培養(yǎng)的腎上皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的腎上皮細胞。本試劑盒包含: ()OptiTDSTM大鼠腎上皮細胞組織解離液(3×ml) (2)大鼠腎上皮細胞組織處理緩沖液(00ml) (3)FibrOutTM大鼠腎上皮細胞成纖維抑制劑 (ml(500x)) (4)大鼠腎上皮組織洗液(5 x 00 ml) (5)大鼠腎上皮細胞生長因子(ml500x)及血清(5x0ml) (6)大鼠腎上皮細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 00ml) (7)大鼠腎上皮組織預(yù)備液 ( x 00 ml) (8)大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟:
大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

CD66 / ALCAM 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD55 / DAF 抗體 (PerCP), 兔單抗 FCM    25 Test

VASN / Vasorin 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Dkk3 / REIC 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CEACAM6 / CD66c 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM    25 Test

PLAUR / CD87 抗體, 鼠單抗 FCM    50 µg

CD3 / Nectin-3 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

Arylsulfatase A / ARSA 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

IL-2 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

GPA33 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)絡(luò)塞維英文名稱:Luo Seville分子式:428.43032分子量:C20H28O0:84954-92-7

2-氯-4-吡分子式:239.44英文名稱:2- chloride -4-:53034-86-7分子量: C5H3ClIN

,5-二羥異喹啉分子式:6.6英文名稱:,5- two hydroxy ISO:88540分子量: C9H7NO2

五氘代氯分子式:7.6英文名稱:Five deuterium substituted:34-55-4分子量: C6ClD5

刺五加苷D英文名稱:Thorn D分子式:742.72分子量:C34H46O8:79484-75-6

叔戊分子式:48.24英文名稱:Tert amylbenzene:2049-95-8分子量: CH6

,2,4-*氧分子式:68.9英文名稱:,2,4- grade three:35-77-3分子量: C9H2O3

,3-二氯-2-丙英文名稱:,3- two -2-分子式:28.98分子量: C3H6Cl2O:96-23-

2-氯-3-硝吡分子式:58.54英文名稱:2- -3- nitro pyridine:5470-8-8分子量: C5H3ClN2O2

-溴-3,5-二甲氧分子式:27.06英文名稱:- two -3,5-:20469-65-2分子量: C8H9BrO2

注意事項:
. 接收到大鼠腎上皮細胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng),肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

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