細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

VCaP (人前列腺癌細(xì)胞)

商品屬性

商品介紹

別稱 VCAP; Vcap; Vertebral Cancer of the Prostate

種屬 人類(lèi)

年齡（性別） 男性，59歲

組織來(lái)源 器官：前列腺； 組織：脊椎轉(zhuǎn)移； 疾?。喊?/span>

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))

生物安全等級(jí) 2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~53-144小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude and SCID mice.

抗原表達(dá)情況 cytokeratin-18; Homo sapiens, expressed p53 antigen; Homo sapiens, expressed prostate specific antigen (PSA); Homo sapiens, expressed prostatic acid phosphatase (PAP); Homo sapiens, expressed Rb protein; Homo sapiens, expressed

基因表達(dá)情況 cytokeratin-18; Homo sapiens, expressed, p53 antigen; Homo sapiens, expressed, prostate specific antigen (PSA); Homo sapiens, expressed, prostatic acid phosphatase (PAP); Homo sapiens, expressed, Rb protein; Homo sapiens, expressed

注意事項(xiàng) 該細(xì)胞貼壁疏松，影響細(xì)胞生長(zhǎng)，建議使用多聚-L-賴氨酸溶液包被培養(yǎng)瓶后進(jìn)行培養(yǎng)，請(qǐng)?zhí)崆皽?zhǔn)備多聚-L-賴氨酸溶液。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠細(xì)胞球蛋白(CYGB)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： CYGB ELISA Kit

Mouse growth hormone releasing peptide (GHRP) ELISA Kit 小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)檢測(cè)試劑盒

Mouseplateletactivatingfactor,PAFELISAKIT 小鼠血小板活化因子(PAF)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHSP47ELISAKit大鼠熱休克蛋白47

細(xì)胞L-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitIL-1α大鼠白介素1α

PCSK9重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白 Protein

CD133 造血干細(xì)胞抗原(多肽抗原 0.5mgCD133 造血干細(xì)胞抗原(多肽抗原)

H1F0重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白 Protein

FCER2 Protein Human 重組人 CD23 / FCER2 蛋白

CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CD133 造血干細(xì)胞抗原(多肽抗原 0.5mgCD133 造血干細(xì)胞抗原(多肽抗原)

FCER2 Protein Human 重組人 CD23 / FCER2 蛋白

PCSK9重組小鼠 PCSK9 / NARC1 蛋白 Protein

CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

H1F0重組人 H1F0 / Histone H1 蛋白 Protein

VCaP (人前列腺癌細(xì)胞)小鼠過(guò)氧化酶(GSH-Px)檢測(cè)試劑盒 96T/48T

Human retinol binding protein 4 (RBP-4) ELISA Kit 人結(jié)合蛋白4(RBP-4)檢測(cè)試劑盒

Humanadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASA檢測(cè)試劑盒人抗骨骼肌抗體(ASA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒10次

Humanueinsulin,TIELISAKit人真胰島素(TI)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠C反應(yīng)蛋白   英文名稱：   C-reactive protein   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   CRP

小鼠CXC趨化因子受體3   英文名稱：   CXC chemokine receptor 3   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   CXCR3

小鼠CXC趨化因子配體16   英文名稱：   CXC chemokine ligand 16   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   CXCL16

小鼠CXCL1/KC   英文名稱：   CXC chemokine ligand 1   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   CXCL1/KC