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使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中降鈣素原(PCT)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人降鈣素原(PCT)水平。用純化的人降鈣素原(PCT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入降鈣素原(PCT),再與HRP標記的降鈣素原(PCT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的降鈣素原(PCT)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波
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ELISA試劑盒各環(huán)節(jié)中常見問題及解決方法
ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。下面分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法一、選擇試劑選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。二、加樣可能原因:1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;2)手工操作中,加樣板過 -
人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)水平。用純化的人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C),再與HRP標記的肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn) -
ELISA檢測系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研生產(chǎn)中最為廣泛最為靈敏的技術(shù)手段。可是在新老手操作過程中總是會出現(xiàn)或大或小的問題,現(xiàn)在給我十個八個的從包被到顯色,一個工作日基本搞定。下面就由我拋磚引玉地來說一下,做ELISA的經(jīng)驗總結(jié):1、包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保存抗原很重要,我做重組蛋白時,師兄都嚴格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。還有有的包被原可能不是蛋白,對于sheng物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對其改造再加以包被,
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使用目的:本試劑盒用于測定蝦樣本中白細胞介素6(IL-6)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中蝦白細胞介素6(IL-6)水平。用純化的蝦白細胞介素6(IL-6)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介素6(IL-6),再與HRP標記的白細胞介素6(IL-6)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素6(IL-6)呈正相關(guān)。用酶標
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使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胎球蛋白A(FETU-A)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人胎球蛋白A(FETU-A)水平。用純化的人胎球蛋白A(FETU-A)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胎球蛋白A(FETU-A),再與HRP標記的胎球蛋白A(FETU-A)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胎球蛋白A
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生物大分子藥物是指分子量大于1000的生物活性分子,如多肽、蛋白質(zhì)等。采用酶聯(lián)免疫吸附法進行生物大分子藥物制劑分析,可以對大分子抗原進行定量測定,對于生物大分子藥物制劑的早期研究和開發(fā)作用巨大。制劑中常含有賦形劑、稀釋劑和附加劑,因此與原料藥物不同。藥物制劑分析指的是對不同劑型的藥物,利用物理、化學(xué),甚至微生物測定的方法進行分子檢測,以檢驗被檢查的制劑是否符合質(zhì)量標準的規(guī)定要求。蛋白多肽類藥物具有免疫原性,因此可以采用免疫分析法測定生物體液中的蛋白多肽類藥物。常用的免疫分析方法有放射免疫分析(R
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如何判斷競爭法、間接法和夾心法 ELISA 中的結(jié)果?
ELISA試劑盒的結(jié)果判定分為定性和定量兩種,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結(jié)果如何判斷呢?一、競爭法在競爭法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應(yīng)中酶結(jié)合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調(diào)節(jié)陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應(yīng)最為敏感。競爭法ELISA不易用自視判斷結(jié)果,因肉眼很難辨別弱陽性反應(yīng)與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,