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  • ELISA操作步驟

    1.包被過程(注意設(shè)置空白對照,陰性對照):將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當(dāng)濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋或?qū)迤椒旁诘撞坑袧窦啿嫉慕饘贊窈兄?2.封閉酶標(biāo)反應(yīng)孔:5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時將封閉液加滿各反應(yīng)孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結(jié)束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.洗滌方法:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動,吸干孔內(nèi)液,傾去液體后在吸
  • 山羊免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒反應(yīng)五要素

    參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易
  • 上海勁馬讓您了解 ELISA試劑盒變質(zhì)的七大原因

    ELISA試劑盒變質(zhì)是ELISA實驗中比較常見的問題,那么,ELISA試劑盒變質(zhì)是因為什么呢?是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保?一旦變質(zhì)會有什么影響呢?今天勁馬小編為大家詳細(xì)分析下。Ⅰ、方法學(xué)的影響ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的bu公平競爭等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。Ⅱ、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過批批
  • 凍存的原代細(xì)胞應(yīng)該如何培養(yǎng)

    原代細(xì)胞(primaryculturecell)是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究,如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學(xué)研究等。一、凍存原代細(xì)胞的培養(yǎng)1.將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛。2.將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化。3.將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。4.用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦
  • ELISA曲線怎么擬合呢?

    有很多客戶向我們咨詢ELISA實驗后如何進(jìn)行曲線制作?那么對于那么多的曲線計算公式,該如何選擇*的擬合方程呢?今天上海勁馬的技術(shù)員就給大家總結(jié)下:ELISA曲線擬合的那些事。我們一般可以用軟件繪制也可以通過excel進(jìn)行制作。按照科學(xué)分析方法,如果存在奇異點或者污點,直接采用線性分析不是很好,要對擬合曲線的幾個點進(jìn)行取舍,同時也可以改用雙對數(shù)直線擬合或者四參數(shù)曲線擬合。那么常用的曲線擬合回歸方程主要為以下幾種:第yi種是直線回歸:直線回歸是簡單的回歸模型,也是zui基本的曲線擬合回歸分析方法,將
  • 血清的制備與使用

    一、血清的制備方法問題。1、問:我的實驗需要自己制備一些血清用于培養(yǎng)細(xì)胞,有沒有人知道用于培養(yǎng)細(xì)胞的血清需要怎樣的制備過程?答:自己制備血清當(dāng)心污染啊。如果無菌條件好的話,用靜置析出方法就行。2、問:一般我們用得胎牛血清用前還要滅活,我想用大鼠的血,不知道要不要滅活?答:你直接把采來的血液在離心管里4℃過夜,離心,取上清,在無菌過濾,也可滅活,然后分裝凍存,用時再配。3、問:如果滅活會不會對血清中的一些因子有損傷?答:加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板
  • 勁馬產(chǎn)品羊口瘡病毒(ORFV)ELISA試劑盒使用說明書

    一、參數(shù)規(guī)格【產(chǎn)品名稱】:勁馬產(chǎn)品羊口瘡病毒(ORFV)ELISA試劑盒使用說明書【供貨期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))【產(chǎn)品用途】:被測樣品定性定量分析【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)【檢測方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)【保存條件】:2-8℃【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝【產(chǎn)品價格】:(含稅含運費,我們?nèi)烫峁〦LISA實驗技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費代測)【銷售優(yōu)勢】:價格行業(yè)優(yōu)勢、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問題包換退【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房
  • 關(guān)于血清滅活的幾個問題

    1、問:加到培養(yǎng)基中的血清必須滅活嗎?答:不是必須的,看做什么實驗了。2、問:四季青胎牛血清滅活是56℃30分鐘嗎?答:如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補(bǔ)體受體的細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞,血清是需要滅活,一般是56℃,30min。3、問:我要做滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng),胎牛血清要滅活嗎?答:進(jìn)口的一般都已滅活,國產(chǎn)的不一定,還是滅活一下再用較安全。4、問:我用病毒上清轉(zhuǎn)染細(xì)胞,培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎?因為血清中可能有些補(bǔ)體和抗體,是
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