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上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司
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ELISA試劑盒標(biāo)本保存，在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中是非常重要的，常有ELISA操作員反映在標(biāo)本保存時(shí)出現(xiàn)溶血、凝集不全、受細(xì)菌污染等現(xiàn)象發(fā)生，我公司技術(shù)員特針對(duì)相關(guān)常見問題做出總結(jié)，下面我們就來看看今天的內(nèi)容：搞定ELISA試劑盒方法我有妙招！一、標(biāo)本保存不當(dāng)在冰箱中保存過久的標(biāo)本，血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性；標(biāo)本放置時(shí)間過長(zhǎng)（如一天以上），有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱，亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾，ELISA測(cè)定的血清
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ELISA實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)及常見問題解答
一、ELISA操作前準(zhǔn)備工作試劑盒的選擇ELISA操作前，應(yīng)做好實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)、選擇適合自己檢測(cè)范圍和靈敏度的試劑盒、提前訂購和準(zhǔn)備試劑及耗材、處理樣本等準(zhǔn)備工作。樣本處理在收集標(biāo)本前需有一個(gè)完整的計(jì)劃，需要清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。ELISA檢測(cè)提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè)，對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集?biāo)本，請(qǐng)取材后，將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，所以避免反復(fù)凍融。二、ELISA -
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）ELISA試劑盒使用說明書
本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）的含量。有效期：6個(gè)月保存條件：2-8℃本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（TGF-α）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α（T -
原代細(xì)胞分離的方法有多種，常用的是機(jī)械解離細(xì)胞法、酶學(xué)解離細(xì)胞法以及螯合劑解離細(xì)胞法，下面我們就介紹酶解聚方法獲得純化的原代細(xì)胞。（1）胰蛋白酶純化法●在去除不需要的組織后，使用無菌的解剖刀和剪子把剩余的組織切成3~4mm小片，通過懸浮在無鈣鎂的平衡鹽溶液中清洗組織碎片。讓組織碎片沉淀，去除上清液。重復(fù)清洗2到3次。●將盛有組織碎片的容器置于冰上，去除殘留的上清液。加入0.25%溶解在無鈣鎂的平衡鹽溶液中的胰蛋白酶（100mg組織加入1ml胰蛋白酶）?！裨?℃孵育6到18小時(shí)，使幾乎沒有胰蛋白酶
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本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小鼠促甲狀腺激素（TSH）的含量。有效期：6個(gè)月保存條件：2-8℃本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷實(shí)驗(yàn)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被小鼠促甲狀腺激素（TSH）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠促甲狀腺激素（TSH）呈正相關(guān)
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關(guān)于細(xì)胞轉(zhuǎn)染，你知道多少？
細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNARNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)?？煞譃樗矔r(shí)轉(zhuǎn)染，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染等瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是指外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個(gè)宿主細(xì)胞可存在多個(gè)拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)幾天，多用于啟動(dòng)子和其他調(diào)控元件的分析。一般來說，超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高，在轉(zhuǎn)染后24-72h內(nèi)分析結(jié)果，常常用到一些報(bào)告系統(tǒng)如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫助檢測(cè)。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是指外源DNA既可以整合到宿主染色體中，也可能作為一種游離體存在。盡管線性DNA比超螺旋DNA轉(zhuǎn)入量低但整合率高。外源DN -
關(guān)于ELISA酶免疫測(cè)定（enzymeimmunoassay）可分為均相（homogenous）和非均相（heterogenous）兩種類型。在均相EIA中可不需進(jìn)行游離的和結(jié)合的標(biāo)記物的分離而直接測(cè)定標(biāo)記物。例如在某種條件下，抗原抗體反應(yīng)后形成的酶標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物中的酶失去其對(duì)底物作用的活力，因而測(cè)出的酶活力直接反映游離的酶標(biāo)記物。均相EIA在臨床檢驗(yàn)中較少應(yīng)用。非均相EIA需先進(jìn)行游離的和結(jié)合的標(biāo)記物的分離。如前所述，固相載體可用作一種分離手段。這種固相酶免疫測(cè)定方法在1971年最初建立時(shí)
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污染向來是在細(xì)胞培養(yǎng)中的大問題。預(yù)防或治理污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素。我們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)時(shí)，在開始階段就要十分重視污染問題，否則會(huì)前功盡棄，這樣不僅浪費(fèi)時(shí)間，也會(huì)浪費(fèi)人力、物力。(一)有哪幾類污染？在細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染不只是指微生物，而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對(duì)細(xì)胞生存有害或造成細(xì)胞不純的物質(zhì)，包括生物和化學(xué)物質(zhì)。1、細(xì)菌污染細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染，即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素，也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴尽Ｒ姷挠懈锾m氏陽性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌
