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科研朋友們,您還在為做ELISA試劑盒實驗在各大貼吧尋求幫助嗎?還在為等“傳說中的大神”回復(fù)讓時間白白流逝嗎?還在為遇到一個問題不知道找誰交流嗎?選擇我們,告別迷茫。今天上海勁馬將帶您了解ELISA步驟核心包括哪些?就拿洗滌來說。這步驟有著決定性的作用,分有浸泡式、流水沖洗式兩種,ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的本公司要求使用的純化水電導(dǎo)率小于1.5μs/cm。一、保溫:在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小
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1.用于一般免染的抗體是否都可以用作免疫沉淀實驗?答:抗體的性質(zhì)對免疫沉淀實驗影響很大??贵w不同,和抗原以及ProteinG或ProteinA的結(jié)合能力也就不同。所以一般免染能結(jié)合的抗體未必能用于IP反應(yīng)。一般來說,多抗是沉淀反應(yīng)zuihao的選擇。另外,純化的單抗、腹水和雜交瘤上清液也可用于免疫沉淀。2.為什么溶解抗原的緩沖液中要加入一定量的蛋白酶抑制劑?答:從活性細(xì)胞裂解出來的樣品中,往往含有一定量的蛋白酶。為防止預(yù)檢測蛋白的分解,修飾,溶解抗原的緩沖液必須加蛋白每抑制劑,并且在低溫下進(jìn)行實
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大家都知道ELISA檢測試劑盒有很多優(yōu)勢,準(zhǔn)確度高也是也是其中優(yōu)勢之一,那么如何知道ELISA檢測試劑盒的準(zhǔn)確度是多少呢?當(dāng)ELISA檢測試劑盒同一樣本達(dá)一定次數(shù)后所得的一組數(shù)據(jù),其中靠近均值(X)的±1SD范圍內(nèi)的數(shù)據(jù),占該組數(shù)據(jù)的68%,在X±2SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的95%,在X±3SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的99%。當(dāng)我們要求檢驗結(jié)果在X±2SD范圍內(nèi)為合格時,將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。準(zhǔn)確度是指測定結(jié)果與真值(或靶值)接近的程度。準(zhǔn)確度不能以數(shù)字表示,往往用不準(zhǔn)確度來衡量。測定結(jié)果
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科研朋友們,您在做實驗時是否遇到過ELISA吸光值一直在衰減這樣的現(xiàn)象呢?昨天上海勁馬業(yè)務(wù)員就收到貴陽醫(yī)學(xué)院的王老師前來咨詢的一個問題:加完顯色液(購買)顯色一定時間后,再加終止液(2MH2SO4,自己配制)后,立即測試其吸光度值,等過幾分鐘再測試吸光度值,發(fā)現(xiàn)兩次測得的吸光度值發(fā)生衰減。第二次均小于次。并且,加終止液時,從條加到第12條后,測試發(fā)現(xiàn),吸光度值從1-12條逐級衰減。前提是這12條酶標(biāo)板都是同一種產(chǎn)品,并且包被相同蛋白,我該怎么辦?經(jīng)過我公司技術(shù)專員的分析,原來ELISA吸光度值衰
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ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可
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BIM試劑盒重點解析干細(xì)胞因子簡介:干細(xì)胞因子又稱肥大細(xì)胞生長因子(MGF),Kit配體(KL)及Steel因子(SLF),是由骨髓微環(huán)境中的基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的一種酸性糖蛋白。其糖基連在肽鍵的N和O集團上,相對分子質(zhì)量31kDa~36kDa,由非共價結(jié)合的兩個相同亞基組成。成熟大鼠的SCF共有248個氨基酸,189個氨基酸的膜外功能區(qū),23個氨基酸的跨膜區(qū),36個氨基酸的胞漿功能區(qū)。大鼠SCF與小鼠和人的SCF同源性分別為94%和79%。SCF有2種存在形式:可溶性和膜結(jié)合型。重組SCF和天然SCF
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如果遇到酶切不動或切不*,該怎么辦?要回答這個問題常常需要了解酶活性單位是如何確定,我們經(jīng)常遇到這樣的問題:1個單位的酶能在60分鐘內(nèi)切1ug的DNA,為什么我們的DNA那么少切那么長時間也不能切開或切*?今天勁馬解析酶切不動或切不*有哪些原因?1、酶是否有活性:酶的活性單位通常是在60分鐘酶切1ugλDNA或特定線狀DNA所需要的酶量。鑒定酶的活性高低不是用您待切的DNA模板,也不是別的公司的酶來判定。因為不同公司酶可能是從不同系統(tǒng)中純化的,雖然識別位點相同,但是酶的特性可能是有差異的。鑒定酶
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ELISA作為經(jīng)典的免疫檢測方法,看起來很平常,然而真正做好它并不容易。它究竟有哪些秘笈呢?不要著急,往下看!1.確定您的樣本類型和試劑盒可以兼容:常見樣本類型有血清,血漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清,如果是廠家實驗驗證過的,可根據(jù)產(chǎn)品說明購買使用?!咀⒁猓貉獫{制備用到的抗凝劑有EDTA、檸檬酸鹽、肝素等多種,相應(yīng)的血漿性質(zhì)存在差異,需單獨確認(rèn)兼容性】。特殊樣本,如尿液、胸腹水、腦脊液、灌洗液、淚液,組織勻漿液等,可能缺乏廠家數(shù)據(jù)支持,這并不是說試劑盒無法應(yīng)用于這些樣本,而是需要咨詢有相關(guān)經(jīng)驗人士或自行實驗驗