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血漿游離血紅蛋白測定實驗中,介紹實驗原理、實驗方法、實驗結果計算以及注意事項.
實驗原理
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無色zui終變?yōu)樗{紫色.根據(jù)顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量.
實驗方法
材料:
1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
2.1%H2O2
3.10%醋酸溶液
4.分光光度計
方法:
1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿.
2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度.
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無色zui終變?yōu)樗{紫色.根據(jù)顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量.
實驗方法
材料:
1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
2.1%H2O2
3.10%醋酸溶液
4.分光光度計
方法:
1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿.
2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度.
3.計算公式
血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100
實驗結果計算
參考范圍:0-40mg/L
注意事項
1.一切容器避免血紅蛋白污染;
2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;
3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確.
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