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表皮生長因子放免試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

2013-4-10  閱讀(1215)

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 表皮生長因子放免試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司,專業(yè)代理R&D、BD、ABCAME、IBL公司的實(shí)驗(yàn)室試劑、耗材、試劑盒、抗體等產(chǎn)品。我司已經(jīng)同全國各大學(xué)校和醫(yī)院建立了定點(diǎn)合作關(guān)系,為廣大科研機(jī)構(gòu)提供了良好的試劑,贏得了良好的信譽(yù)。我們將繼續(xù)努力,力爭上游,竭誠為客戶做到的服務(wù)和保障。

表皮生長因子試劑盒,標(biāo)本量;100ul;靈敏度:0.2-27(ng/ml)
規(guī)格:50/100T

用途:本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍:                                                          96T

3pg/ml-160pg/ml

使用目的:

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中表皮生長因子含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人表皮生長因子水平。用純化的人表皮生長因子抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入表皮生長因子,再與HRP標(biāo)記的表皮生長因子抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的表皮生長因子呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人表皮生長因子濃度。

操作程序總結(jié):

 

計(jì)算

  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

注意事項(xiàng)

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4 請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請(qǐng)避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司,長期代理進(jìn)口原裝人及動(dòng)物科研實(shí)驗(yàn)放免試劑盒,質(zhì)量保障。

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