液相色譜儀 工作原理、特點(diǎn)、儀器組成
High Performance Liquid Chromatography
南京科捷與您共享：液相色譜儀工作原理、液相色譜儀器特點(diǎn)及儀器組成。
一、液相色譜儀概況及液相色譜工作原理
色譜法的分離原理是：溶于流動(dòng)相（ phase）中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí)，由于與固定相（stationary phase）發(fā)生作用（吸附、分配、離子吸引、排阻、親和）的大小、強(qiáng)弱不同，在固定相中滯留時(shí)間不同，從而先后從固定相中流出。又稱(chēng)為色層法、層析法。
色譜法zui早是由植物學(xué)家茨維特（Tswett）在1906年研究用碳酸鈣分離植物色素時(shí)發(fā)現(xiàn)的，色譜法（Chromatography）因之得名。后來(lái)在此基礎(chǔ)上發(fā)展出紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法。
液相色譜法開(kāi)始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動(dòng)相，稱(chēng)為經(jīng)典液相色譜法，此方法柱效低、時(shí)間長(zhǎng)（常有幾個(gè)小時(shí)）。液相色譜法（High performance Liquid Chromatography，HPLC）是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會(huì)引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱(chēng)高壓液相色譜法（High Pressure Liquid Chromatography，HPLC）。又因分析速度快而稱(chēng)為高速液相色譜法（High Speed Liquid Chromatography，HSLP）。也稱(chēng)現(xiàn)代液相色譜。
二、液相色譜儀HPLC的特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)
HPLC有以下特點(diǎn)：
高壓——壓力可達(dá)150~300 Kg/cm2。色譜柱每米降壓為75 Kg/cm2以上。
高速——流速為0.1~10.0 ml/min。
——可達(dá)5000塔板每米。在一根柱中同時(shí)分離成份可達(dá)100種。
高靈敏度——紫外檢測(cè)器靈敏度可達(dá)0.01ng。同時(shí)消耗樣品少。
HPLC與經(jīng)典液相色譜相比有以下優(yōu)點(diǎn)：
速度快——通常分析一個(gè)樣品在15~30 min，有些樣品甚至在5 min內(nèi)即可完成。
分辨率高——可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到*分離效果。
靈敏度高——紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，熒光和電化學(xué)檢測(cè)器可達(dá)0.1pg。
柱子可反復(fù)使用——用一根色譜柱可分離不同的化合物。
樣品量少，容易回收——樣品經(jīng)過(guò)色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。
對(duì)于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、相對(duì)分子質(zhì)量大的有機(jī)物原則上都可用HPLC進(jìn)行分離、分析。
三、液相色譜儀儀器組成結(jié)構(gòu)圖
* 檢測(cè)器
溶質(zhì)性檢測(cè)器
紫外,電化學(xué)檢測(cè)器
總體檢測(cè)器:介電常數(shù)檢測(cè)器
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