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上海酶聯(lián)生物研究所
上海酶聯(lián)生物研究所
閱讀：182發(fā)布時間：2013-5-9
人白細胞介素-2ELISA 檢測試劑盒
用 途：
人IL-2 ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的IL-2 。本試劑盒可以檢測天然和重組的IL-2 。本試劑盒于科研、而非用于臨床診斷。
試驗原理：
人IL-2 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IL-2 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將IL-2 和*標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-2 的濃度呈比例關(guān)系。
自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
此試劑盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV為陰性，但沒有實驗室可*保證此血制品不會傳染肝炎、AIDS或其它傳染病，依據(jù)當(dāng)?shù)氐陌踩珬l例處理本試劑盒里的成份及血清和血漿等樣品。
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
人白細胞介素-2ELISA 檢測試劑盒
操作注意事項
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人白細胞介素-2ELISA 檢測試劑盒
試劑的準(zhǔn)備
標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。
洗滌緩沖液（20×）的稀釋：蒸餾水20倍稀釋。
操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作四次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作四次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育15分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
結(jié)果分析
以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的IL-2 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的IL-2 含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
局限
6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。
試劑盒性能
靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
特異性：不與人其它細胞因子反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
人白細胞介素-2ELISA 檢測試劑盒
DA1722-0.2mlELAVL1/HuR（ELAV-like protein 1/Hu-antigen R） ELAVL1抗體0.2ml
DA1723-0.2mlEmp1 （epithelial membrane protein 1） 表皮膜蛋白1抗體0.2ml
DA1724-0.2mlsFRP-4 抗子宮內(nèi)膜抗體0.2ml
DA1725-0.1mlEndostatin 內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體0.1ml
DAP127-0.1mlPhospho-Dab1 （Ser491） 磷酸化Disabled 1抗體0.1ml
DAP128-0.1mlPhospho-DARPP32 （Thr34） 磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體0.1ml
DAP129-0.1mlPhospho-DARPP32 （Thr75） 磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體0.1ml
DAP130-0.1mlPhospho-DBC1 （Thr454） 磷酸化膀胱癌缺失基因10.1ml
DA1725-0.2mlEndostatin 內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體0.2ml
DA1726-0.1mlbeta endorphin （β-endorphin） 抗β內(nèi)啡肽抗體0.1ml
DA1726-0.2mlbeta endorphin （β-endorphin） 抗β內(nèi)啡肽抗體0.2ml
DA1727-0.2mlenvelope glycoprotein Yellow fever virus 抗黃熱病毒包膜糖蛋白抗體0.2ml
DA1728-0.2mlENPP1/PC-1（ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 1） 抗核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體0.2ml
DA1729-0.2mlENPP3/CD203c（ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3） 抗ENPP3抗體0.2ml
DAP132-0.1mlphospho-DNA PK （Thr2609） 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體0.1ml
DAP133-0.1mlPhospho-p56Dok2（Tyr351） 磷酸化D*激酶衰減蛋白2抗體0.1ml
DAP134-0.1mlPhospho-p56Dok2（Tyr299） 磷酸化D*激酶衰減蛋白2抗體0.1ml
DAP135-0.1mlPhospho-EEF2 （Thr56） 磷酸化真核翻譯延長因子2抗體0.1ml
DAP136-0.1mlPhospho-EEF2k （Ser366） 磷酸化真核延伸因子激酶2抗體0.1ml
商鋪：http://m.hg1112.cn/st32881/
主營產(chǎn)品：ELISA試劑盒，人ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒，豚鼠ELISA試劑盒，兔ELISA試劑盒，羊ELISA試劑盒，牛ELISA試劑盒，雞ELISA試劑盒，鴨ELISA試劑盒，植物ELISA試劑盒
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