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有關(guān)試劑盒標準曲線做不好有哪些原因原因

時間:2023/3/21閱讀:2482
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試劑盒被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,但測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果,引起測定錯誤結(jié)果的原因主要有:

(1)試劑盒因素

(2)標本因素

(3)操作因素


試劑盒需要注意的事項是:

1. 在做完整的實驗過儀器之前,儀器預(yù)熱半小時,這個計算好時間,也可以直接將儀器一直開著,直到整個實驗結(jié)束。

2. 在加液過程中不要使槍頭觸及到板子底部,一般槍頭都懸空,可以將槍頭靠在孔邊緣,

3. 但槍頭尖懸空,如果槍頭上殘留液體看整體多少量,不要吹打下去,特別忌諱在版孔內(nèi)壁流向版孔,整個加液過程不要產(chǎn)生氣泡(洗滌液除外)。


試劑盒標準曲線做不好的原因分析:

A、剛加完顯色劑時梯度明顯,顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。

B、酶濃度太高,導(dǎo)致zui后顯色結(jié)果都是高的。

C、包被:酶標系統(tǒng)不匹配或者酶標的非特異反應(yīng)太強,或者酶標儀讀數(shù)范圍不夠。

D、樣本中有能夠催化底物的物質(zhì),沒洗下來。

建議:包被、酶標重新做梯度,先用較低的濃度把梯度摸索好,然后再優(yōu)化靈敏度,zui后調(diào)出所需的靈敏度、線性范圍。

建議:有條件的話,可以把酶免的蛋白系統(tǒng)移植到板式化學(xué)發(fā)光上,加完底物三分鐘讀數(shù)。

建議:蛋白系統(tǒng)靈敏度夠的話,顯色十分鐘就差不多了。

建議:酶是自己標的這種情況的,HRP比例不要太高。


2.jpg

以上是有關(guān)試劑盒標準曲線做不好有哪些原因。上海通蔚生物公司將進一步加強人才培養(yǎng)、產(chǎn)品創(chuàng)新,持續(xù)不斷地提升企業(yè)核心竟爭力,實現(xiàn)具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識化創(chuàng)業(yè)團隊的化大集團企業(yè),更好、更快捷、更*的服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,迎接新一輪世界經(jīng)濟一體化所帶來的機遇與挑戰(zhàn)。


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