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ELISA試驗(yàn)中為什么要洗刷?這一過(guò)程有那么重要嗎?
洗刷雖不是一個(gè)反響過(guò)程,但卻也決議著試驗(yàn)的勝敗。ELISA靠洗刷來(lái)到達(dá)別離游離的和結(jié)合的酶符號(hào)物的意圖。通過(guò)洗刷以鏟除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反響過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的攪擾物質(zhì)。
重點(diǎn)剖析:ELISA試劑盒洗刷的兩大辦法
一、浸泡式
1.吸干或甩干孔內(nèi)反響液;
2.用洗刷液過(guò)洗一遍(將洗刷液注滿板孔后,即甩去);
3.浸泡,行將洗刷液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖擺,浸泡時(shí)刻不行隨意縮短;
4.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
5.重復(fù)操作c和d,洗刷3-4次(或按闡明規(guī)則)。在間接法中如本底較高,可增加洗刷次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)刻。
二、流水沖刷式
開(kāi)始用于小珠載體的洗刷,洗刷液僅為蒸餾水乃至可用自來(lái)水。洗刷時(shí)附接一特別設(shè)備,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗,持續(xù)沖刷 2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖刷式則比如淋浴,其洗刷作用更為*,且也簡(jiǎn)潔、快速。已有試驗(yàn)表明,流水沖刷式相同也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗刷作用更佳。
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