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ELISA試劑盒所需求樣本應(yīng)該這樣做
ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗(yàn)中要害的一步,稍有不小心將導(dǎo)致試驗(yàn)滿盤皆輸,怎么安全,快捷的處理樣本,為幫忙大家了解ELISA試劑盒所需求樣本處理及要求,我司何做出了以下的分析:
1. 血清:室溫血液自然凝結(jié)10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過程中如出現(xiàn)堆積,應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細(xì)胞影響。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右 (2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。細(xì)心搜集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管搜集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度到達(dá)100萬/ml左右。通過重復(fù)凍融,以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清 。保存過程中如有堆積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
5. 安排標(biāo)本:切開標(biāo)本后,稱取重量。參加一定量的PBS,PH7.4。用液氮靈敏冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本消融后依然保持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充沛。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本搜集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行試驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免重復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3克制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
ELISA技術(shù)的操作要害
的試劑,出色的儀器和正確的操作是確保ELISA檢測效果可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所差異,國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn).本文將敘說板式留意要害,要詳細(xì)的使用說明,嚴(yán)峻遵循規(guī)則操作,必能得出的效果.
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