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原代細胞的培育質(zhì)量至關(guān)重要

時間:2021/1/17閱讀:1675
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原代細胞是非常靈敏的細胞,需求傳統(tǒng)培育基之外的額定養(yǎng)分物質(zhì)。為了優(yōu)化存活和成長,需求針對每種細胞類型選擇特定的培育基。例如,內(nèi)皮細胞對養(yǎng)分的需求與上皮細胞或神經(jīng)元有很大區(qū)別,因而需求特制的內(nèi)皮細胞培育基。而傳統(tǒng)的細胞培育基依靠血清供給成長因子、激素、脂質(zhì)和其他的未知組分,以支持細胞的成長。但對于原代細胞,高血清水平可導(dǎo)致細胞分化,或促進污染細胞如成纖維細胞的成長。

原代細胞的培育是指直接從機體取下細胞、安排和器官后立即進行培育。因而,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培育,此刻的細胞保持原有細胞的根本性質(zhì),如果是正常細胞,依然保存二倍體數(shù)。但實際上,一般把一代至第十代以內(nèi)的培育細胞統(tǒng)稱為原代細胞培育,是細胞培育中很重要的,其質(zhì)量決定著傳代細胞的質(zhì)量,因而它的培育的質(zhì)量至關(guān)重要。

 試驗步驟:
 1.試劑耗材預(yù)備;
 2.取新鮮動物安排;
 3.酶消化;
 4.過濾網(wǎng)挑選、別離細胞;
 5.加培育液,37℃、5%CO2培育;
 6.傳代;
 7.凍存;
 8.復(fù)蘇。
 
應(yīng)用:
1.為研究生物體細胞的成長、代謝、繁殖供給有力的手段;
2.為傳代培育創(chuàng)造條件;
3.服務(wù)于僅供研究使用,

此外,增加血清也遭到成本上升及不同批次間差異性的困擾。配制具有很少或沒有血清的特殊培育基則可以防止這些問題,并且愈加有利于促進特定類型細胞的成長。此外,其他一些實踐,例如在更多的生理學(xué)相關(guān)底物上接種原代細胞而不是使用合成聚合物,可以明顯的促進細胞貼壁、增殖及保持純度。
 

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