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廣東環(huán)凱生物科技有限公司
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M44大腸桿菌O157乳膠凝集試劑盒一、用途大腸桿菌O157乳膠凝集檢測(cè)試劑用于從糞便樣品中經(jīng)選擇性平板分離的可疑菌落進(jìn)行快速乳膠凝集確證鑒定
M44 大腸桿菌O157乳膠凝集試劑盒
一、用途
大腸桿菌O157乳膠凝集檢測(cè)試劑用于從糞便樣品中經(jīng)選擇性平板分離的可疑菌落進(jìn)行快速乳膠凝集確證鑒定??蓮牟∪烁篂a樣品中分離出的菌落快速區(qū)分大腸O157與其它大腸桿菌血清型。該試劑盒僅供專業(yè)人員使用。
二、原理
乳膠顆粒表面包被與大腸桿菌O157脂多糖抗原具有特異性的抗體。當(dāng)敏化的乳膠顆粒遇到含有O157抗原的菌懸液時(shí),可發(fā)生特異性、高靈敏度的免疫化學(xué)反應(yīng),使分散的乳膠微粒迅速形成肉眼可見(jiàn)的凝集。
三、試劑盒組成成分
REAG TEST 測(cè)試試劑 HM44a 大腸桿菌O157乳膠測(cè)試試劑 2.5mL
乳膠顆粒包被與大腸桿菌O157具有特異性的兔抗血清。含0.099%的防腐劑。(藍(lán)色瓶蓋)
REAG CONTROL 對(duì)照試劑 HM44b 對(duì)照乳膠試劑 2.5mL
乳膠顆粒包被不與大腸桿菌O157反應(yīng)的兔抗體,含0.099%的防腐劑。(黑色瓶蓋)
NaCl 0.85% 0.85%鹽水 HM40 0.85%生理鹽水 5.0mL
含0.099%的防腐劑。(白色瓶蓋)
使用說(shuō)明書(shū)
檢測(cè)板
攪拌棒
需要的其它材料
l 接種環(huán)
l 麥康凱瓊脂(含1%D-不含乳糖的麥康凱瓊脂)
四、警告和注意事項(xiàng)
安全:
1、試劑僅供體外診斷使用。
2、試劑盒作防腐劑使用的可與鉛或銅制品反應(yīng)形成易爆的金屬疊氮化物??捎么罅克疀_洗以避免疊氮化物的堆積。
3、在處理或檢測(cè)可疑致病菌時(shí)應(yīng)采取適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施。被污染的物品可用3%的次氯酸鈉消毒處理30分鐘。含酸的廢液應(yīng)作中和處理。
檢測(cè)過(guò)程:
1、大腸桿菌O157乳膠凝集試劑盒應(yīng)按說(shuō)明書(shū)使用。
2、所有試劑在使用前應(yīng)達(dá)到室溫。
3、不要稀釋試劑盒內(nèi)的任何試劑
4、不要混合不同批次試劑盒的試劑。
5、不要冷凍試劑盒內(nèi)的試劑。
6、不要使檢測(cè)乳膠試劑的滴管接觸到陽(yáng)性對(duì)照試劑或細(xì)菌樣品。
7、使用前應(yīng)確保檢測(cè)板清潔干燥。
8、試驗(yàn)時(shí)應(yīng)注意檢測(cè)過(guò)程中的質(zhì)量控制部分。
9、注意凝集狀態(tài),呈凝乳狀或纖維狀可能為非真實(shí)凝集。
五、貯存及保質(zhì)期
檢測(cè)試劑盒不使用時(shí)應(yīng)貯存在2~8℃,并應(yīng)在包裝盒標(biāo)簽上的有效期內(nèi)使用檢測(cè)試劑。
六、樣本
病人的樣品(血糞便樣品)應(yīng)在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上分離培養(yǎng),35~37℃有氧培養(yǎng)18~24小時(shí)。產(chǎn)毒素的大腸桿菌O157:H7菌落顏色為無(wú)色,菌落形態(tài)與其它的大腸桿菌相似。
七、檢測(cè)過(guò)程
質(zhì)量控制:
在每次使用檢測(cè)試劑盒前應(yīng)作下列質(zhì)量控制檢測(cè)以確證試劑的有效性
1、檢測(cè)試劑的控制:分別滴1滴測(cè)試試劑(HM44a)和1滴對(duì)照試劑(HM44b)于檢測(cè)板的二個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)。并在該兩個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)再分別各滴加1滴生理鹽水(HM40),各用1支攪拌棒在整個(gè)區(qū)域內(nèi)混勻液體,輕搖檢測(cè)板30秒,觀察2個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)是否會(huì)出現(xiàn)凝集。如果出現(xiàn)凝集反應(yīng),表明測(cè)試試劑、對(duì)照試劑或生理鹽水可引起非特異性凝集,應(yīng)廢棄處理。
2、陽(yáng)性對(duì)照的控制:按測(cè)試程序(如下所述),在檢測(cè)板的二個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)各滴1滴已知的大腸桿菌O157菌懸液,輕搖檢測(cè)板30秒,觀察2個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)是否會(huì)出現(xiàn)自動(dòng)凝集。如果二個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)均無(wú)凝集反應(yīng),則分別滴1滴測(cè)試試劑(HM44a)和1滴對(duì)照試劑(HM44b)于2個(gè)測(cè)試反應(yīng)環(huán)內(nèi),然后分別混勻檢測(cè)試劑與菌懸液,輕搖檢測(cè)板,觀察2個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)凝集結(jié)果,測(cè)試試劑反應(yīng)環(huán)內(nèi)應(yīng)出現(xiàn)明顯凝集,對(duì)照試劑反應(yīng)環(huán)內(nèi)應(yīng)無(wú)凝集發(fā)生。如果未出現(xiàn)此2種現(xiàn)象,說(shuō)明試劑失效或污染,應(yīng)廢棄處理。
測(cè)試程序:
1、各滴1滴(約30μL)生理鹽水(HM40)于檢測(cè)板的2個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)。
2、用接種環(huán)從表康凱瓊脂平板上挑取無(wú)色的可疑菌落。
3、與反應(yīng)環(huán)內(nèi)的生理鹽水混合,形成均勻的混濁的菌懸液,并將菌懸液均勻涂布于整個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)。
4、輕搖檢測(cè)板30秒,觀察是否會(huì)出現(xiàn)自動(dòng)凝集現(xiàn)象。如果菌懸液保持均勻狀態(tài),繼續(xù)第5步。如果菌懸液出現(xiàn)纖維狀或顆粒狀自凝現(xiàn)象,在加入乳膠試劑后易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果,因此這種樣品不適合采用乳膠試劑檢測(cè)。應(yīng)選用其它方法檢測(cè)。
5、搖勻乳膠測(cè)試試劑。
6、將1滴乳膠測(cè)試試劑和1滴對(duì)照試劑分別滴加至2個(gè)反應(yīng)環(huán)內(nèi)的菌懸液。不要使試劑的滴管接觸到菌懸液。
7、兩個(gè)反應(yīng)環(huán)分別用1支干凈的攪拌棒將菌懸液和乳膠試劑混合均勻。
8、輕輕搖動(dòng)檢測(cè)板,在2分鐘內(nèi)觀察結(jié)果,凝集反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生明顯的乳膠顆粒凝集現(xiàn)象。
9、記錄結(jié)果后,將攪拌棒和檢測(cè)板進(jìn)行適當(dāng)?shù)南咎幚怼?/p>
八、結(jié)果說(shuō)明
按下表進(jìn)行判斷結(jié)果
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