從Western blot的繁重勞動(dòng)中解放出來
摘要： 
Western blot想一次成功，那幾乎是mission impossible。這么多的環(huán)節(jié)，這么多的試劑，往往需要反復(fù)優(yōu)化，才能獲得理想的結(jié)果。然而，一家公司提出了一個(gè)很牛的口號(hào)，那就是“絕不多跑一次（Never Run a Gel Again）"。這家公司就是ProteinSimple。 
Western blot想一次成功，那幾乎是mission impossible。這么多的環(huán)節(jié)，這么多的試劑，往往需要反復(fù)優(yōu)化，才能獲得理想的結(jié)果。然而，一家公司提出了一個(gè)很牛的口號(hào)，那就是“絕不多跑一次（Never Run a Gel Again）"。這家公司就是ProteinSimple。 
ProteinSimple不像其他公司那樣，對(duì)傳統(tǒng)的Western blot進(jìn)行改進(jìn)，而是*改造，利用毛細(xì)管電泳將整個(gè)過程自動(dòng)化，創(chuàng)建出Simple Western分析。2011年，這家公司推出了Simon，*臺(tái)自動(dòng)化開展Western blot的儀器。它改變了我們對(duì)于Western blot的想象，堪稱蛋白實(shí)驗(yàn)室的“dream machine"。這臺(tái)儀器上市后，市場(chǎng)反應(yīng)熱烈。
2014年初，ProteinSimple又推出了三款儀器，分別是Wes、Sally Sue和Peggy Sue。Wes（韋斯）作為經(jīng)濟(jì)的Simple Western儀器，能夠在3小時(shí)內(nèi)分析多達(dá)25個(gè)樣品。Sally Sue（薩莉?蘇）和Peggy Sue（佩姬?蘇）則是高通量的儀器，每次能夠分析96個(gè)樣品。此外，Peggy Sue還能按照電荷分離蛋白，大大節(jié)省樣品的用量。 
這些儀器將所有步驟自動(dòng)化，包括蛋白分離、免疫雜交、洗滌、檢測(cè)以及數(shù)據(jù)分析。你只需將樣品、一抗、二抗和檢測(cè)試劑加入微孔板，按下Start就行了。之后的幾小時(shí)便由你自由支配?；貋頃r(shí)，等著你的就是*分析好的數(shù)據(jù)了。
Simple Western可以兩種方式開展 – 根據(jù)大小或電荷分離蛋白質(zhì)。 
基于大小的分析可在Wes、Peggy Sue或Sally Sue上開展。當(dāng)?shù)鞍籽刂?xì)管內(nèi)一個(gè)堆積和分離基質(zhì)遷移時(shí)，它們分離。分離后的蛋白固定到毛細(xì)管壁上。之后利用一抗鑒定目標(biāo)蛋白，用HRP結(jié)合的二抗和化學(xué)發(fā)光底物檢測(cè)蛋白。系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)報(bào)告檢測(cè)蛋白的分子量和信號(hào)。
整個(gè)過程不需要手動(dòng)操作，這大大減少了實(shí)驗(yàn)的可變性，提高了數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性和可靠性。據(jù)統(tǒng)計(jì)，Western blot的實(shí)驗(yàn)差異性高達(dá)35-45%，而有了這些儀器，差異性能夠控制在15%以下。對(duì)于25個(gè)樣品的分析，Wes在3小時(shí)內(nèi)即可完成。即使是96個(gè)樣品，19個(gè)小時(shí)也能搞定。它們能分離和檢測(cè)高達(dá)440 kDa的蛋白，這對(duì)研究大蛋白的童鞋來說真是福音。