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上海華壹生物科技有限公司
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更新時間：2017-08-09 14:14:20瀏覽次數(shù)：498次
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人β2糖蛋白Ⅰ（β2-GPⅠ）ELISA試劑盒實驗目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關
液體樣本中β2 糖蛋白Ⅰ（β2-GPⅠ）含量。
HE022
人β2糖蛋白Ⅰ(β2-GPⅠ)ELISA試劑盒
Humanβ2-Glycoprotein 1(β2-GPⅠ)ELISA Kit
檢測范圍：
30μg/L -1000μg/L
操作步驟：
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔 10 孔，在*、第二孔中分別加標
準品 100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液 50μl，混勻；然后從*孔、第二
孔中各取 100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液 50μl，
混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 棄掉，再各取 50μl 分別加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液 50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各
取 50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50μl，混
勻后從第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準
品稀釋液 50μl，混勻后從第九第十孔中各取 50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為 50μl，
濃度分別為 900μg/L，600μg/L ，300μg/L，150μg/L，75μg/L）。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl（樣
品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混
勻。
3. 加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。
4. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
5. 配液：將 30（48T 的 20 倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30（48T 的 20 倍）倍稀釋后備用。
6. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復 5 次，拍干。
7. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯
色 10 分鐘.
8. 終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
9. 人β2糖蛋白Ⅰ(β2-GPⅠ)ELISA試劑盒測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止
液后 15 分鐘以內進行。
Humanβ2-Glycoprotein 1(β2-GPⅠ)ELISA Kit
Assay range:
30μg/L-1000μg/L
Assay procedure:
1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution 50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separay. then add Standard dilution 50μl to the third and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl to the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the tenth well, mix , take out 50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 900μg/L, 600μg/L, 300μg/L, 150μg/L, 75μg/L)
2.Add sample：Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.
3.Add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except blank well.
4.Incubate:After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.
5.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.
6.Washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.
7.Color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the
light preservation for 10 min at 37℃
8.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).
9.Assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.
人β2糖蛋白Ⅰ(β2-GPⅠ)ELISA試劑盒供應商：上海華壹生物科技有限公司
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