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小鼠單抗Ig分型試劑盒
一、試劑原理:本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細(xì)胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類(可區(qū)分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA)。采用小鼠抗體共有位點(diǎn)的二抗包被微孔板,與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合,再加入HRP標(biāo)記的抗小鼠各類、亞類的抗體來分別反應(yīng),zui后用TMB底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止,再通過酶標(biāo)儀檢測吸光度來判斷被測單克隆抗體的類或亞類。本試劑盒具有*的分辨率,是您鑒定小鼠單克隆抗體類、亞類的可靠工具。
二、組成成分: 酶標(biāo)板 含自封袋1個(gè) 192孔 標(biāo)本稀釋液 30ml
通用陽性對(duì)照 內(nèi)含小鼠 Ig(G1\G2a\G2b\G3\M\A) 2ml 顯色劑A 20ml
酶標(biāo)二抗 6種 6×4ml 顯色劑B 20ml
20×清洗液 50mL 反應(yīng)終止液 20ml
封板膜 4張 說明書和加樣圖 各1份
三、使用范圍:用于小鼠單克隆抗體Ig類、亞類的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。 四、使用方法:
1、首先將試劑盒恢復(fù)室溫(大約30分),然后用純水把清洗液配成工作濃度(一份濃縮清洗液加19份純水)。
2、取出酶標(biāo)板。每個(gè)標(biāo)本需要6孔,陽性對(duì)照6孔。多余的用自封袋保存,記得放入干燥劑。
3、將細(xì)胞培養(yǎng)上清(或特異親和純化的抗體)50μl加入酶標(biāo)微孔板,每個(gè)標(biāo)本加6孔,陽性對(duì)照也是加6孔每孔50μl。然后每孔再加入50μl標(biāo)本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
4、棄去板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。再在每個(gè)標(biāo)本的6孔中分別加入6種酶標(biāo)二抗各100μl,通用陽性對(duì)照的6孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
5、吸棄板內(nèi)液體,洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干或機(jī)洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl,換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。 6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果,看顯色藍(lán)的那個(gè)孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。更可將反應(yīng)終止液(每孔50μl)終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀450nm測定波長,630nm參考波長雙波長測定結(jié)果,參看高值孔所對(duì)應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。陽性對(duì)照0D小于0.5實(shí)驗(yàn)無效,需要重做。 五、產(chǎn)品特點(diǎn):高靈敏度、高特異性、結(jié)果容易判定。當(dāng)然您如果覺得很多試劑自己可以準(zhǔn)備想省一筆費(fèi)用,那您可以登陸選擇我們?yōu)槟鷾?zhǔn)備的簡裝抗體鑒定產(chǎn)品C030215。當(dāng)然您也可以下次把標(biāo)本交給我們來做并且不會(huì)增加太多費(fèi)用??!
六、保存條件:2-8℃避光保存效期一年。不正確存放或過于頻繁開啟使用有可能因此使效期縮短
七、注意事項(xiàng):
1、雖然本試劑盒過期后很久還有使用價(jià)值但還是請(qǐng)您在有效期內(nèi)使用。
2、在檢測腹水類單抗時(shí)要稀釋到1/5萬,雖然可以分辨但并不建議您這樣做。此類樣品成分十分復(fù)雜,有干擾結(jié)果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的C030215抗體鑒定試劑。它會(huì)給您帶來滿意的結(jié)果。
3、手洗板子時(shí)一定要把孔加滿,停留10秒然后棄盡,zui后要拍干凈。特別是在酶標(biāo)二抗溫育后洗板時(shí)一定要把酶吸出而不是甩出,要吸凈。這個(gè)在手工洗板時(shí)對(duì)結(jié)果很重要。
4、一次沒用完的板子要帶干燥劑放自封袋封好,隨盒存放。
5、拿放板子時(shí)不要?jiǎng)×叶秳?dòng),以免孔間交叉污染出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果。
6、出現(xiàn)異常結(jié)果請(qǐng)隨時(shí)咨詢我們。 特別提示:不具備ELISA基礎(chǔ)知識(shí)和操作的人員不要完成此實(shí)驗(yàn)或類似實(shí)驗(yàn),因?yàn)檫@可能會(huì)給您帶來錯(cuò)誤的結(jié)果和不必要的損失。
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