大鼠E選擇素（E-Selectin）ELISA檢測試劑盒組成配制

1. 酶聯(lián)板：一塊（96孔）
標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為10,000 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋10,000 pg/ml，5,000 pg/ml，2,500 pg/ml，1,250 pg/ml，625 pg/ml，312.5 pg/ml，156 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制5,000 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml 10,000 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
2. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。
3. 檢測稀釋液A：1×10ml/瓶。
4. 檢測稀釋液B：1×10ml/瓶。
5. 檢測溶液A：1×120ul/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（每孔100ul），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如1ul檢測溶液A加99ul檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
6. 檢測溶液B：1×120ul/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
7. 底物溶液：1×10ml/瓶。
8. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
9. 終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

大鼠E選擇素（E-Selectin）ELISA檢測試劑盒注意事項(xiàng)

1. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
2. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
3. 請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。
4. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先稀釋后再測定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。
5. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
6. 底物請(qǐng)避光保存。