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ELISA檢測(cè)腎綜合征Ag/IgE和Ag/IgD-CIC

閱讀:554發(fā)布時(shí)間:2012-2-18

抗原抗體雙特異性CIC是同一抗原與不同Is類型抗體IC的集合。其操作步驟如下:兔抗人ISD用0.1mol/L,pH9.6碳酸鹽緩沖液稀釋(終濃度分別為5ug/mL與10ug/mL),加入40孔聚苯乙烯反應(yīng)板,每孔0.2mL,43℃包被過(guò)夜。

用洗滌液PBST(0.01mol/LpH7.4PBS含0,05%Tween-20)洗3次,加入1:2稀釋的待檢血清(稀釋液為含10%NCS的PBST),37℃作用2h,洗滌3次。加入適當(dāng)稀釋的HRP標(biāo)記的兔抗?jié)h坦病毒抗體,37%作用2h,洗滌3次。加入OPD-H202底物液,顯色10—15rain,用2mol/H2S04終止反應(yīng)。將反應(yīng)板置酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀讀取492nmOD值。以P/N大于或等于2.1為陽(yáng)性。

臨床意義:IsE和IgD兩型CIC檢出率的動(dòng)態(tài)變化相似,即疾病早期較高,4~8病日達(dá)高峰,此后漸降。不同病型腎綜合征出血熱患者兩型CIC檢出情況與病情輕重有密切關(guān)系,提示此兩型CIC參與了對(duì)漢坦病毒的清除及免疫病理反應(yīng)。


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