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溴酚藍配置方法說明

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溴酚藍一種pH 指示劑,在pH 3.0~4.6范圍,顏色由黃變藍。常用做電泳指示染料,凝膠中電泳遷移速度在小分子核酸或蛋白質(zhì)區(qū)域。

 

溴酚藍從乙酸及丙酮混合液中析出者為長六角形棱柱狀結(jié)晶。近似黃色或淺玫瑰色結(jié)晶性粉末,微溶于水及乙醚,溶于乙醇或稀堿液及氨液中呈藍色。PH變色范圍 3.0(黃)~4.6(藍紫) 微溶于水,易溶于甲醇、乙醇和苯,可自由溶于氫氧化鈉溶液,同時形成溴酚藍鈉鹽水溶液。

 

溴酚藍是pH指示劑,pH=3.0時呈黃色,pH=4.6時呈藍紫色。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,蛋白電泳染色;病毒化驗等。 將*磺酰酞懸浮于醋酸中,然后徐徐加入溴,并使溴過量,在攪拌下,于50℃進行反應而得溴酚藍。

 

溴酚藍有3種配置方法:

1、1%的溴酚藍:將托盤天平上稱取1g溴酚藍定溶于100ml無水乙醇中,轉(zhuǎn)移入滴瓶中,貼標簽備用。

2、0.05%的溴酚藍 :配western blot用的2*SDS上樣緩沖液需要用到0.1%的溴酚藍,2-DE中溴酚藍一般也是配成0.1%母液。實際上,溴酚藍在水中的溶解度不高,直接將0.1g溴酚藍溶于100ml水是有困難的。下面是其較合適的配制方法: 0.05%的溴酚藍配制方法:取溴酚藍0.1g,加0.05mol/L氫氧化鈉溶液3.0ml使溶解,再加水稀釋至200ml,即得。 變色范圍pH2.8~4.6(黃→藍綠)。只是不知道加入NaOH會不會影響2-DE實驗。估計影響不大,因為指示劑用量畢竟很少。

3、1%溴酚藍 :加1g水溶性鈉型溴酚藍于100ml水中,攪拌或渦旋混合直到*溶解。溴酚藍其鈉鹽易溶解在水里。


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