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總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)操作中常見(jiàn)問(wèn)題有哪些

閱讀：706發(fā)布時(shí)間：2012-11-02

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總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)操作中常見(jiàn)問(wèn)題有哪些：

 

1 標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素：

 

嚴(yán)重溶血，以 HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性，催化底物顯色造成假陽(yáng)性； 混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈；如有 細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)； 標(biāo)本凝固不全，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè)，常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊，易造成假陽(yáng)性結(jié)果； 采血試管洗滌不*、反復(fù)使用易交叉污染； 塑料試管能吸附抗原物質(zhì)，樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。

 

 

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